ИФА анализ

ИФА анализ

Общая информация

При диагностике инфекционных и прочих гинекологических заболеваний иммуноферментный анализ не может непосредственно «найти» возбудителя как это сделает анализ ПЦР, и определить его специфичные свойства (количество и чувствительность к антибиотикам) как при сдаче бак посева на флору. Он лишь указывает на наличие антител в крови человека, обозначая присутствие постороннего микроорганизма в организме.

⚠ ИФА на коронавирус (тест или анализ крови на COVID-19) сдать в нашей лаборатории в настоящее время, к сожалению, нельзя.

Суть ИФА анализа

Для диагностики ряда ЗППП и половых инфекций, наряду с ПЦР, сдают анализы крови. Так, иммуноферментный метод (ИФА) обладает высокой чувствительностью и специфичностью, которая составляет 90%. Материалом служит сыворотка венозной крови, взятой натощак. Основное же достоинство ИФА анализа крови на на хламидии, микоплазму, уреаплазму, сифилис и другие возбудители — возможность определения болезни и возможность прослеживать динамику развития процесса, на который указывает уровень антител. Чем острее протекает заболевание, тем выше будет уровень иммуноглобулинов определенного класса в анализе крови. Исследование может проводиться несколько раз, что позволяет по сути оценить эффективность лечения или изменение состояния здоровья.

Показания к исследованию

Сдать ИФА анализ следует прежде всего для диагностики следующих заболеваний и выявления антител к:

  1. сифилису,
  2. паразитам (кишечным инфекциям),
  3. ВИЧ инфекции,
  4. вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
  5. герпетическим инфекциям;
  6. кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту;
  7. инфекциям, передающимся половым путем;
  8. хеликобактеру пилори;
  9. герпетическим инфекциям и др.

Другие области применения ИФА анализа крови:

  1. Определение содержания гормонов в сыворотке крови;
  2. Тесты на онкомаркеры;
  3. Исследование иммунного и интерферонового статуса организма;
  4. Диагностика аллергии на продукты, лекарства и т.д.

Что показывает ИФА анализ

IgM
наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя, так и показывать переход инфекции в хроническую стадию.

IgA
при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции. IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.

IgG
говорит либо о хронизации заболевания, либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекции.

Результаты ИФА анализа

В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы антител или антигенов (см. ниже) с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указан результат ив количественном формате.

Источник:
http://women-health-center.moscow/analizy/diagnostika/ifa_krovi/

Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.

ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.

Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.

Спецпредложения, скидки и акции помогут существенно сэкономить на медицинском обследовании.

Контроль качества лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, — дополнительная гарантия точности результатов анализов.

Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.

Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).

Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.

Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.

Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.

Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).

Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.

Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.

Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.

ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.

Преимущества метода

Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.

ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.

Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Недостатки метода

К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.

В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.

ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Показания к назначению и выявляемые заболевания

Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:

  1. Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
    • IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
    • IgG к ВИЧ;
    • Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
    • Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
    • Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
    • Ig M и IgG к токсоплазмозу;
    • Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
    • IgG к паразитарным заболеваниям;
    • Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
    • IgG к хеликобактерной инфекции.
  2. Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.
  3. Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).
  4. Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).

Анализируемый биоматериал и особенности его забора

Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.

Сроки готовности результатов ИФА

При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.

Читайте также  Что лучше: Карсил или Аллохол? Можно ли принимать вместе? Формы выпуска

Расшифровка иммуноферментного анализа

Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Анализируемые показатели

  • IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
  • IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
  • IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
  • IgG говорит либо о хронизации заболевания, либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

Возможные результаты ИФА

В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.

Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.

Где можно сдать биоматериала на иммуноферментный анализ?

Информативность ИФА делает этот анализ важным инструментом в работе многих медицинских центров. Но можно ли доверять такую диагностику государственным лабораториям или лучше самим выбрать, где провести такое исследование?

«Хронические инфекции — большая проблема современной медицины. Когда по разным причинам не удается вовремя поставить диагноз, болезнь переходит в вялотекующую стадию и постепенно подтачивает организм, — рассказывает специалист сети независимых лабораторий «ИНВИТРО». — В поликлиниках и стационарах, работающих в рамках общественной системы здравоохранения, не всегда есть ресурсы для целенаправленного поиска таких инфекций, поэтому бывает, что врачи предоставляют разбираться с проблемой самостоятельно. Но не стоит обращаться в первую попавшуюся частную лабораторию, конечно, если вам не нужен сомнительный результат, который никак не поможет в диагностике. Только те медицинские центры, которые работают в соответствии с международными стандартами качества, могут провести ИФА по всем правилам, избежав ошибок и искажений в процессе анализа. Так, наша лаборатория «ИНВИТРО» одной из первых предложила пациентам проведение ИФА в частном порядке, и за минувшие двадцать лет мы завоевали безупречную репутацию и помогли сотням тысяч человек».

Источник:
http://www.kp.ru/guide/immunofermentnyi-analiz.html

Иммуноферментный анализ ифа

Иммуноферментный анализ (ИФА) — один из видов иммунохимического анализа. Он основан на высокоспецифической иммунологической реакции антигена (АГ) с соответствующим антителом (АТ) с образованием иммунного комплекса. При этом один из компонентов конъюгирован с ферментом. В результате реакции фермента с хромогенным субстратом образуется окрашенный продукт, количество которого можно определить спектрофотометрически.

Любой вариант ИФА содержит 3 обязательные стадии:

  1. Стадия узнавания исследуемого соединения специфическим антителом;
  2. Стадия формирования связи конъюгата с иммунным комплексом или со свободными местами связывания;
  3. Стадия превращения ферментной метки в регистрируемый сигнал.

В реакции участвуют:

  • Твердая фаза;
  • АГ и АТ;
  • Конъюгат (антиген или антитело, меченые ферментом);
  • Ферментный маркер;
  • Субстрат;
  • Стоп-реагент (чаще всего применяют серную кислоту).

Твердая фаза

В качестве твердой фазы для проведения ИФА можно применять различные материалы: полистирол, поливинилхлорид, полипропилен и другие. Твердой фазой могут служить стенки пробирки, 96-луночные и др. планшеты, шарики, бусины, а также нитроцеллюлозные и другие мембраны, активно сорбирующие белки.

Антигены и антитела

АГ и AT, используемые в ИФА, должны быть высокоочищенными и высокоактивными. АГ должны обладать высокой антигенностью, оптимальной плотностью расположения и количеством антигенных детерминант.
Чувствительность ИФА зависит от концентрации, активности и специфичности используемых антител. Используемые АТ могут быть поли- или моноклональными, различного класса (IgG или IgM) и подкласса (IgG1, IgG2).
Чувствительность и специфичность метода повышается при использовании моноклональных антител. В этом случае появляется возможность обнаруживать низкие концентрации АГ (AT) в образцах.

Ферментные маркеры: наибольшее применение нашли пероксидаза хрена (ПХ), щелочная фосфатаза (ЩФ) и β-D-галактозидаза.

Субстраты

Выбор субстрата, в первую очередь, определяется используемым в качестве метки ферментом, так как реакция «фермент-субстрат» высокоспецифична.

  • Для ПХ в качестве субстрата используют 3,3’,5,5’-тетраметилбензидин (ТМБ хромоген). Происходит цветная реакция, интенсивность которой зависит от количества связанного определяемого вещества;
  • Для ЩФ субстратом является 4-нитрофенилфосфат;
  • β-D-галактозидаза катализирует гидролиз лактозы с образованием глюкозы и галактозы.


Классификация ИФА

В основу классификации методов ИФА положено несколько подходов:

1 — по типу реагентов, присутствующих на первой стадии ИФА:

  • В конкурентном ИФА на первой стадии в системе присутствуют одновременно анализируемое соединение и его аналог, меченный ферментом и конкурирующий за центры специфического связывания с ним;
  • Для неконкурентных методов характерно присутствие на первой стадии только анализируемого соединения и специфичных к нему центров связывания.

2 — по принципу определения исследуемого вещества:

  • Прямое определение концентрации вещества (АГ или АТ). Используют антитела к исследуемому веществу, соединенные со специфической меткой. В этом случае метка будет находиться в образовавшемся специфическом комплексе АГ-АТ. Концентрация определяемого вещества будет прямо пропорциональна регистрируемому сигналу;
  • Непрямое определение концентрации вещества – по разности общего числа мест связывания и оставшихся свободными центров связывания. Концентрация определяемого вещества при этом будет возрастать, а регистрируемый сигнал снижаться, следовательно, в данном случае прослеживается обратная зависимость от величины регистрируемого сигнала.

3 — по типу результатов:

  • Количественный;
  • Полуколичественный;
  • Качественный.


Конкурентный ИФА

  1. На твердой фазе иммобилизованы специфические моноклональные антитела;
  2. В лунки панелей вносят в известной концентрации антиген, меченный ферментом, и исследуемый образец. Параллельно в соседних лунках ставят положительный и отрицательный контроли. Для построения калибровки используют стандартный немеченый антиген в различных разведениях. Проводят инкубацию и отмывку;
  3. Добавляют субстрат, инкубируют, останавливают реакцию при развитии оптимального окрашивания в лунках с положительным контролем;
  4. Проводят учет результатов на ИФА-ридере. Концентрация определяемого вещества обратно пропорциональна оптической плотности.

Конкурентный ИФА для определения антител: искомые антитела и меченые ферментом антитела конкурируют друг с другом за антигены, сорбированные на твердой фазе.


Неконкурентный «сэндвич» – вариант ИФА

Основным достоинством метода является высокая чувствительность, превосходящая возможности других схем ИФА.

  1. На твердой фазе иммобилизованы моноклональные антитела или аффинно-очищенные поликлональные антитела;
  2. В лунки панелей вносят исследуемый образец, параллельно ставят положительный контрольный образец и отрицательный контрольный образец в различных разведениях. Инкубируют и отмывают;
  3. В лунки вносят меченные ферментом моноклональные или поликлональные антитела —конъюгат. После инкубации проводят отмывку для удаления несвязавшихся антител;
  4. Вносят субстрат, инкубируют. Реакцию останавливают при достижении оптимального окрашивания в лунках с положительным контролем;
  5. Проводят учет результатов на ИФА-ридере. Концентрация определяемого вещества прямо пропорциональна оптической плотности.

Качественный анализ часто используют при скрининговых исследованиях и диагностике инфекционных заболеваний. Результат исследования определяется при сравнении его оптической плотности с расчетной величиной критической оптической плотности (ОПкрит., «Cut-off»).

Формулу для расчета «Cut-off» указывают в инструкции к тест-системе. В расчете «Cut-off» могут участвовать как усредненные значения оптических плотностей положительных и отрицательных контролей, так и оптическая плотность специального контрольного образца — контроля уровня среза.
Если оптическая плотность образца выше, чем Cut-off, образец считается положительным на специфические антитела.

Для полуколичественного варианта проведения методики рассчитывают отношение между средней оптической плотностью образца и оптической плотностью Cut-off.

Образцы рассматриваются как:

  • положительные, если отношение более 1,1;
  • сомнительные, если отношение 0,9–1,1;
  • отрицательные, если отношение менее 0,9.

Сомнительные результаты анализа нельзя однозначно интерпретировать и для уточнения результата необходимо повторить обследование через 1–2 недели.


Методом ИФА определяют
:

  • Гормоны;
  • Онкомаркеры;
  • Антитела (IgG, IgM) к возбудителям заболеваний — ToRCH-инфекций, туберкулеза, сифилиса, к вирусу гепатита С (ат ВГС), микоплазме, хламидиям, лямблиям, Helicobacter pylori и др.;
  • Антигены вирусов —гепатит D, Е, А (ВГD, ВГЕ, ВГА), гепатит С (ВГСсore), гепатит В (НВs, НВе НВсore);
  • Аутоиммунные заболевания.

Источник:
http://medach.pro/post/2047

Иммуноферментный анализ (ИФА) – суть современного метода диагностики и область применения

Иммуноферментный анализ (ИФА-диагностика) – современный метод лабораторного диагностирования, который идентифицирует специфические антитела крови и антигены определённой болезни.

Данный метод используется в медицине с 1960-х годов. Изначально он имел очень трудоёмкую специфику исследования, поэтому его массовое применение считалось затруднительным. Благодаря усовершенствованию микротехнологий и открытию новых биополимерных материалов стало возможным использование ИФА массово. Это произошло в 1980 году. В первую очередь, ИФА-анализатором были оборудованы центры переливания крови и венерологические отделения.

Область применения ИФА

Применение иммуноферментного анализа очень обширно, оно охватывает почти всю медицину. Особенно важен ИФА в онкологии, когда возможно определить начало заболевания на самых ранних стадиях.

В клинической диагностической лаборатории существует множество панелей иммуноферментного анализа для выявления и ранней диагностики инфекционного процесса, гормональных сбоев, аутоиммунных заболеваний, венерических болезней. ИФА-диагностикой пользуются при тестировании лекарственных препаратов, их воздействия на организм человека. Область применения ИФА-диагностирования весьма обширна и может применяться для выявления:

  • нарушений репродуктивной функции;
  • нарушений в щитовидной железе;
  • нарушений иммунной системы;
  • инфекционных заболеваний;
  • маркеров онкологических заболеваний.

Это перечень самых распространённых анализов. Полный список иммуноферментного анализа довольно большой и постоянно обновляется.

Суть ИФА-диагностирования

Иммуноферментный анализ состоит из двух компонентов: иммунной и ферментативной реакций. Обе эти части данного метода работают сообща. Иммунная реакция находит болезнетворные микробы и микроорганизмы, а ферментативная – переводит полученные результаты в измеримую форму.

ИФА различают как прямой и непрямой, конкурентный и неконкурентный. При прямом ИФА берут антитела к нужному антигену и соединяют между собой ферментативной реакцией. При непрямом методе ИФА производится двойной контроль.

В организме антитела (иммуноглобулины) вырабатываются как ответ на обнаружение вируса, микроорганизма или бактерии. Иммуноглобулины бывают разных видов: IgA, IgE, IgD, IgM, IgG. При определении того или иного вида иммуноглобулина применяется полистироловая панель. В лунках панели приготовлен чистый антиген. Вступая в реакцию с сывороткой крови, антиген и иммуноглобулин образуют особый антиген. На следующем этапе благодаря образовавшемуся особому антигену происходит появление иммунных комплексов, в результате чего в лунках планшета окрашивается вещество, насыщенность цвета которого зависит от числа антител пациента.

Читайте также  Монастырский антипаразитарный чай: состав, как пить, лечебные свойства, правда или развод

Все тест-системы для проведения иммуноферментного анализа проходят тщательную диагностику и укомплектацию необходимыми реагентами. При проведении ИФА нужно сверять результат с конкретной тест-системой, на которой проводится анализ, так как у каждой тест-системы свои показатели.

Результаты ИФА-диагностики на примере сифилиса

Чтобы определить наличие сифилиса, необходим иммуноферментный анализ. Кровь пациента берётся из вены натощак. Для проведения анализа используется панель со специфичностью АТ классов A, M, G. Антитела при сифилисе производятся в конкретной последовательности, поэтому благодаря ИФА можно точно определить, когда настало заражение и какая стадия болезни на данный момент у пациента. На планшете ответ на анализ на сифилис будет иметь следующий вид:

  • отрицательный результат оставит лунки бесцветными;
  • положительный результат окрасит лунки в жёлтый цвет.

Интенсивность окрашивания прямо пропорциональна зависимости связанных между собой антигенов и антител.

ИФА-диагностирование на ВИЧ-инфекции

В мире, где заразиться ВИЧ (Вирус иммунодефицита человека) возможно даже при походе к стоматологу, очень остро стоит вопрос о диагностики этого заболевания. Сейчас пройти исследования крови на ВИЧ можно в анонимной лаборатории. Кровь берётся из вены. Целесообразно проводить ИФА-диагностику на ВИЧ после переливания крови, полового акта без презерватива и т.д. Обязательно стоит учитывать инкубационный период заболевания. Он может составлять от 40 до 95 дней.

Существует два вида ВИЧ-инфекции: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. ИФА выявляет антитела класса G уже в позднем течении болезни. Для ранних сроков определения ВИЧ используются рекомбинантные тест-системы, где антитела класса А и М выявляют болезнь.

Если всё-таки определяется ВИЧ, то для постановки окончательного диагноза проводится тщательное лабораторное обследование. Кровь из первого забора подвергается повторной перепроверке на новой тест-системе. Если положительный результат повторяется, кровь у пациента берётся повторно и тестируется. В случае повторного положительного результата кровь тестируют особо чувствительной тест-системой 3 раза подряд. Если результаты теста повторяются, проводят иммуноблотинг, и только после этого даётся окончательный ответ.

ИФА-диагностика на хламидии, цитомегаловирус, паразиты

Такие серьёзные заболевания, как цитомегаловирус и хламидиоз, возможно определить иммуноферментным анализом с точностью до дня инфицирования, а также в какой стадии данное заболевание сейчас находится, какое лечение будет наиболее эффективно.

Когда в анализе определяется хламидия, появляются антитела класса А, М, G:

  • антитело (IgM) определяется в первые дни инфицирования;
  • антитело (IgA) определяется после 30 дня инфицирования;
  • антитело (IgG) определяется независимо от времени инфицирования. Иммуноглобулины этого вида находятся в организме и помогают отслеживать лечение.

С цитомегаловирусом сложнее. ЦМВ проявляется в IgM, когда заболевание уже циркулирует в организме больше месяца. И наоборот – IgG определяет развитие начальной (острой) стадии болезни или повторное реинфицирование вирусом. При исследовании иммуноферментного анализа на IgG необходимо учитывать авидность антитела IgG. Если антитело низкоавидное, это значит, что инфекция находится на своей первичной стадии. Высокоавидный IgG означает хроническую форму заболевания, также это показывает сформированный устойчивый иммунитет.

Наличие паразитов в организме очень опасно. Существуют такие виды вирусов, определить которые можно только посредством ИФА-диагностики. Иммуноферментный анализ определяет наличие паразитов, даже если они пребывают в форме от цисты до взрослого гельминта. По анализу крови можно определить наличие инфекции в любом органе. Организм человека выделяет антитела в ответ на инородные антигены, что и покажут результаты диагностики методом иммуноферментного анализа.

Благодаря изобретению иммуноферментного анализа люди получили возможность диагностировать огромное количество опасных заболеваний. Сейчас можно сдать кровь (берётся только кровь из вены) в любой диагностической лаборатории и получить достоверный результат в короткие сроки.

Сдаём анализ на иммуноглобулины

Болезнь в свободном доступе: можно ли случайно заразиться сифилисом

Анализ на ТОРЧ: проверяемся на опасные инфекции перед беременностью

Источник:
http://myvenerolog.ru/ifa-diagnostika/

Анализ ИФА: что это такое? зачем он нужен? плюсы и минусы метода

Анализ ИФА – что это такое? Полное наименование этого метода диагностики называется иммуноферментный анализ крови, и он основан на определении в периферической крови антител различных классов, или иммуноглобулинов, которые вырабатывает человеческий организм.

В практике врача ИФА – анализ занимает очень важное место, когда нужно диагностировать какую – либо инфекционную патологию. Этот анализ показывает не только факт наличия инфекционного заболевания, но так же и стадии патологического процесса. Также не только в отношении возбудителя метод ИФА показан к применению: он используется для диагностики аллергических состояний. Этот тест позволяет выявить проблемы в системе иммунитета, при многих заболеваниях кроветворной системы, аутоиммунных и других расстройствах.

Зачем нужен ИФА?

Все исследователи склоняются к тому, что название «антитело» выбрано слишком неудачно. Но все-таки оно отражает одну важную особенность иммуноглобулинов: они способны связывать и нейтрализовывать вредные вещества, подходя к ним как «ключик» к «замочку». Количество антител в крови отражает не только общую способность организма к защите от инфекций, но так же и способность к образованию циркулирующих иммунных комплексов, которые могут возникнуть при различных аутоиммунных болезнях, например, при ревматоидном артрите или болезни Бехтерева.

Комплексы антител с антигеном (вредным фактором инфекционной природы) – это результат ответной реакции организма на внедрение «чужаков». Поэтому иммунитет учится распознавать их, с помощью лимфоцитов обучает иммунокомпетентные клетки, и они способны продуцировать высокоспецифичные антитела. Так, антитела к вирусу Эпштейна устроены иначе, чем антитела к вирусному гепатиту С, или к кишечной палочке, а anti-HAV, или антитела к вирусу гепатита А – иначе, чем аутоантитела к хрящевой ткани. Именно высокая специфичность, и соответствие иммуноглобулинов инфекционному возбудителю и делает высокую ценность такому лабораторному исследованию, как иммуноферментный анализ крови.

После прочной связи антител и антигенов в единый комплекс (антиген-антитело) вредные факторы утрачивают свою способность к повреждению тканей организма, и затем эти комплексы или нейтрализуются, или лизируются с помощью фагоцитоза нейтрофилами, и, «перевариваясь», покидают организм.

Анализ крови ИФА может показать, с каким определенным болезнетворным фактором сталкивается наш организм, на какой стадии находится процесс взаимодействия организма с инфекцией. После проведенного исследования врач может с высокой степенью уверенности сделать прогноз, назначить определенные виды лечения, а в некоторых случаях даже может определить продолжительность жизни пациента, особенно при хронических вирусных инфекциях, например, при вирусном гепатите С.

Но в некотором случае, в организме вообще нет никаких инфекционных агентов, и антитела по «ошибке» набрасываются на собственные органы и ткани, поскольку иммунокомпетентные клетки получили ложную информацию. Такие заболевания называют аутоиммунными, и иммуноферментный анализ крови также помогает распознать эту хроническую патологию, и помочь в диагностике.

Подробнее об иммуноглобулинах

Всего человеческий организм вырабатывает 5 известных классов антител, которые обозначаются Ig (что расшифровывается как иммуноглобулины), которые принадлежат классам A, M, G, E, и D. Все они имеют большое значение в интерпретации результатов ИФА – анализа. Конечно, комплексов значительно больше, и далеко не все они еще открыты. Но в диагностике разных болезней наиболее ценны первые три типа антител. Анализ крови на ИФА использует максимум информации: момент появления антител в крови, изменение их концентрации в зависимости от времени, срок исчезновения, а также тип специфических антител.

Так, участниками первичного, острого инфекционного процесса являются иммуноглобулины класса М, которые всегда свидетельствуют об острой фазе, даже в том случае, когда клинически болезнь протекает стерто. Характерный пример – безжелтушная форма острого вирусного гепатита В или С. Иммуноферментный анализ крови на гепатиты покажет, что у человека есть острый гепатит, и такие симптомы, как боли в подреберье, сухость во рту, ломота в суставах и другие неспецифические симптомы становятся легко понятными.

Спустя несколько недель эти антитела обнаруживаются во все более исчезающей концентрации, уступая иммуноглобулинам класса G. Они определяются в крови долгие месяцы, и даже годы, и свидетельствуют или о выздоровлении, и тогда могут оставаться пожизненно, формируя прочный иммунитет. Это свидетельствует о мощной защите от антигенов возбудителей. Так, именно антитела этого класса делают человека невосприимчивым к повторным случаям заболевания сибирской язвой и чумой. Но бывают случаи, когда эти антитела не препятствуют при наличии антигенов их вредному влиянию. В таком случае речь может идти о повышении активности хронического процесса.

Что касается IgE, то он имеет применение в диагностике различных паразитарных инвазий и аллергических состояний, а IgD выполняет вспомогательную функцию: метод иммуноферментного анализа позволяет использовать его в комплексной диагностике бронхиальной астмы и аутоиммунных состояний. Конечно, расшифровка ИФА-анализа значительно более сложная, и специалисты – иммунологи могут рассказать гораздо больше. По каким же показаниям пациент может самостоятельно обратиться в лабораторию, чтобы выполнить исследования?

Показания к анализу

Прежде всего, нужно понять, что нет такого анализа – «просто кровь на ИФА». Бывает анализ на гепатиты, бывает – на уреаплазму, или на сифилис. Таким образом, сдавать кровь на ИФА можно только прицельно, «заказав» поиск нужной инфекции. Просто так непонятно, зачем сдавать кровь из вены, не зная, что нужно искать. Вот почему метод иммуноферментного анализа – это мощный инструмент, который важен в диагностическом поиске. Только врач может назначить этот анализ, поскольку он целенаправленно ищет инфекцию, для которой характерны данные симптомы. Обычный человек, конечно, может заказать 150 анализов крови методом ИФА на «все инфекции», но это будет неразумным и затратным подходом к диагностике, сдавая анализы на все подряд.

Наиболее востребовано назначение этих анализов при следующих заболеваниях и состояниях:

Различные микробные и вирусные инфекции, симптомы инфекционных заболеваний – сыпь, лихорадка, желтуха, увеличение лимфоузлов, синдром диареи, подозрения на заболевания, передающиеся половым путем.

Помогает методика ИФА при определении уреаплазмы и микоплазмы, сифилиса и хламидиоза, туберкулеза и цитомегаловирусной инфекции, герпеса, вирусных гепатитов и вируса Эпштейн-Барра. В настоящее время около 500 различных инфекций можно верифицировать с помощью метода иммуноферментного анализа,

При подозрении на глистные инвазии, и наличии таких симптомов, как аллергия, эозинофилия в крови, кожный зуд, диспепсия и похудение,

Подробнее о данном виде исследования читайте в статье «Анализ крови на глисты и паразиты: методы исследований, ИФА, кому и как сдавать?».

Читайте также  Ацикловир-Акрихин инструкция по применению: показания, противопоказания, побочное действие – описание Aciclovir-Akrikhin таб

При выявлении аллергенов, которые вызывают отек Квинке, крапивницу, одышку и приступы астматического удушья.

В этом случае выявляются конкретные Ig E, и существуют целые аллергопанели, которые помогут точно определить аллерген – кальмары или креветки, сухой корм для рыбок, содержащий дафнии, домашнюю пыль. При поллинозе этот метод позволяет найти точно тот злак, кустарник или дерево, который вызывает весеннее чихание и слезотечение,

  • Показан этот метод при подозрении на аутоиммунные заболевания, которые лечат врачи-ревматологи,
  • При подозрении на опухолевый рост и активность,
  • В комплексной диагностике иммунодефицитных состояний и ВИЧ – инфекции,
  • При заболеваниях крови и в трансплантологии, для комплексной оценки иммунитета, например, перед пересадкой печени или почек.

Теперь мы знаем, зачем нужно сдавать кровь на ИФА. Выясним, как проводится это исследование.

Как выполняется анализ?

Классический материал – это венозная кровь пациента. Но при необходимости, можно исследовать самую разную жидкость и ткань: слизь, слюну, цервикальный секрет, цереброспинальную жидкость, стекловидное тело глаза, содержимое пупочного канатика и околоплодные воды. Важно помнить, что прием различных лекарств, избыточная физическая активность, злоупотребление алкоголем, может сильно исказить результаты анализов.

Существуют несколько методов, которые позволяют проводить этот анализ. Чаще всего в клинических лабораториях используют фотометрический способ. При этом используют меченые краской вещества, после реакции которых, и маркировки комплекса антиген-антитело изменяется их окраска. В результате изменяется и оптическая плотность раствора, и это изменение прямо пропорционально концентрации обнаруженных антител. Лабораторные спектрофотометры успешно используются для измерения этих отклонений.

Также для проведения ИФА используется флуориметрический метод, основой которого является флуоресценция. Здесь тоже высчитывается интенсивность флуоресцирующих веществ, которые осели на исследуемых образцах.

Наконец, в иммунологическом анализе используют электрохимические способы определения активности ферментов, которые являются особыми метками для антигенов и антител. Сам иммуноферментный метод чаще всего подразумевает использование таких ферментов, как щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена и галактозидаза. Эти ферменты способны связываться с антителами или антигенами и маркировать их вследствие своей активности.

Минусы метода и его плюсы

К очевидным «плюсам» можно отнести демократичную себестоимость анализа, возможность его скринингового использования у широких групп населения, например, при обследовании беременных на ВИЧ. Метод иммуноферментного анализа достаточно спецефичен, и может применяться для контроля качества лечения многих заболеваний. Немаловажно, что анализ готовится быстро, и является простым и безопасным для пациента.

Существует, однако, много «подводных камней». Так, если иммуноглобулины не выявлены, то это еще не говорит о 100% отсутствии заболевания. Ведь на фоне иммунодефицита у организма просто может не «быть сил» на синтез антител. Если у пациента тяжелая печеночная недостаточность, то печень просто не в силах синтезировать белок – строительный материал для антител. В таком случае результат называют серонегативным, и требуется подтверждение инфекции уже прямым и самым совершенным методом исследования – ПЦР, или полимеразной цепной реакцией. В отличие от иммуноферментного анализа, при этом методе выявляется не реакция организма на инфекционный процесс (которая может быть дефектной, или отсутствовать вовсе), при ПЦР определяется непосредственно наследственный материал, или находится сам возбудитель.

Метод иммуноферментного анализа может дать ошибку на фоне многих хронических болезней, на фоне иммуносупрессивной терапии. В гельминтологии же и паразитологии существует закон: только обнаружение паразита, или его яиц, является абсолютно надежным способом постановки диагноза. ИФА может давать перекрестные и ложноположительные методы, реагируя на многие нормальные события в жизни пациента.

В заключение нужно сказать, что метод иммуноферментного анализа является мощным, но вспомогательным способом лабораторной диагностики многих заболеваний. Но в любом случае, диагноз должен выставляться на основании многих факторов: жалоб и анамнеза пациента, данных осмотра, других вспомогательных и инструментальных методов диагностики.

Источник:
http://kardiobit.ru/analizy/analizy-krovi/analiz-ifa-chto-eto-takoe-zachem-on-nuzhen-plyusy-i-minusy-metoda

ИФА, иммуноферментный анализ, показатели

ИФА, иммуноферментный анализ крови, основан на иммунной реакции организма, когда в ответ на попадание возбудителя или просто инородного белка в организм человека в его крови образуются антитела, их называют иммуноглобулины. Эти антитела связываются с чужеродным белком и стараются вывести его из организма.

Иммуноферментный анализ крови, что это такое

Высокая скорость проведения ИФА диагностики позволяет выявить инфекцию на самых ранних стадиях. По результатам иммуноферментного исследования можно отслеживать и динамику заболевания во времени. Данный анализ показывает не только наличие болезни на данный момент, но и то, что человек уже переболел данным заболеванием.

  • ИФА анализ на наличие антител (иммуноглобулинов) выглядит, как набор символов –
  • IgM,IgG, IgA, IgE, IgD.
  • Всего изучено 5 из них – IgM,IgG, IgA, IgE, IgD.
  • В практической медицине значение имеют первые четыре иммуноглобулина.

Болезни, которые можно выявить методом ИФА

Иммуноферментный анализ используется для диагностики многих заболеваний:

  • вирусных и бактериальных инфекций,
  • первичных и вторичных иммунодефицитов,
  • гематологических и системных заболеваний,
  • паразитарных инвазий. Например, с помощью исследование крови методом ИФА можно определить наличие гельминтов в организме и их вид. Точность метода гораздо выше, чем анализ кала.

Вместе с ИФА диагностикой при определенных заболеваниях проводится дополнительно ДНК – диагностика ПЦР анализ, который позволяет уточнить диагноз, вид возбудителя и его количество в организме.

Иммуноглобулин IgM, показатели, норма

  • IgM — это первый и основной маркер острой фазы инфекционного заболевания.
  • При первичной инфекции вырабатываются антитела одного класса, они называются иммуноглобулины M- обозначаются IgM.
  • Их наличие в крови говорит о том, что организм болеет, и является показанием для назначения лечения.
  • Входит в состав фракции гамма глобулинов, составляет около 10% от общего количества иммуноглобулинов сыворотки крови. Первым появляется после введения антигена (чужеродного белка).
  • К IgM отноятся противоинфекционные антитела, антитела групп крови, ревматоидный фактор.

Норма IgM в сыворотке крови: 0,5 – 3,5 г/л

Болезни, при которых повышено содержание IgM

  1. Острые грибковые, паразитарные, вирусные и бактериальные инфекции.
  2. Гепатит и цирроз печени.
  3. Системная красная волчанка.
  4. Ревматоидный артрит.
  5. Кандидоз.
  6. Системные васкулиты.

Болезни, при которых снижено содержание IgM

  1. Физиологическое снижение у детей младше 6 месяцев.
  2. Спленэктомия.
  3. Лучевая болезнь.
  4. Лечение цитостатиками и иммунодепрессантами.
  5. Отравления (толуол, бензин, ксилол).

Иммуноглобулин IgG, показатели, норма

  • В процессе заболевания начинают вырабатываться другие антитела, иммуноглобулины G – обозначаются IgG.
  • Они сохраняются и после излечения, для некоторых инфекций на всю жизнь, например, корь, краснуха и другие.
  • Обнаружение в крови иммуноглобулинов G говорит о том, что раньше организм уже встречался с этой инфекцией, именно с этим конкретным возбудителем, и выработал против него иммунитет.
  • Присутствие в крови иммуноглобулина G — это благоприятный признак, он не требует лечения.
  • IgG входит состав фракции гамма глобулинов, составляет около 70% – 75% от общего количества иммуноглобулинов сыворотки крови.
  • Обеспечивает пассивный иммунитет.

Норма IgG в сыворотке крови: 7 – 17 г/л

Заболевания, при которых повышено содержание IgG

  1. Аутоиммунные заболевания.
  2. Ревматизм.
  3. Системная красная волчанка.
  4. Ревматоидный артрит.
  5. Миеломная болезнь.
  6. ВИЧ.
  7. Инфекционный мононуклез.
  8. Острые хронические и инфекционные заболевания.

Заболевания, при которых снижено содержание IgG

  1. Лучевая болезнь.
  2. Лечение цитостатиками и иммунодепрессантами.
  3. Отравления (толуол, бензин, ксилол).
  4. Цирроз печени.
  5. Физиологическое снижение у детей младше 6 месяцев.

Видео, Жить здорово, о коронавирусе и иммунитете

Причины присутствия в анализе IgM и IgG одновременно

Если при определенном заболевании в результатах проведенного исследования крови методом ИФА, выявлено одновременное присутствие обоих классов иммуноглобулинов, M и G, это говорит об обострении хронической инфекции, и требуется лечение.

Иммуноглобулин A(IgA), показатели, норма

  • IgA — это антитела, которые являются защитным фактором слизистых оболочек человеческого организма.
  • Входят в состав фракции бета – глобулинов и составляют около 15% от общего количества иммуноглобулинов сыворотки крови.
  • Содержатся в молоке, слюне, слезной жидкости, секретах слизистых оболочек.

Норма IgA в сыворотке крови: 0,9 – 4,5 г/л

Болезни, при которых повышено содержание IgA

  1. Хронические заболевания печени.
  2. Системная красная волчанка.
  3. Ревматоидный артрит.
  4. Миеломная болезнь.
  5. Гломерулонефрит.
  6. Алкогольное поражение внутренних органов.

Болезни, при которых снижено содержание IgA

  1. Физиологическое снижение у детей младше 6 месяцев.
  2. Цирроз печени.
  3. Лучевая болезнь.
  4. Отравления (толуол, бензин, ксилол).
  5. Применение цитостатиков и иммунодепрессантов.

Иммуноглобулин E(IgE), показатели, норма

  • IgE – это антитела, маркеры, при заражении паразитами и при аллергии.
  • В плазме крови содержится в незначительном количестве.
  • Принимают участие в аллергических реакциях и противопаразитарном иммунитете.

Норма IgE в сыворотке крови: 30 – 240 мкг/л

Болезни, при которых повышено содержание IgE

  1. Наличие паразитов – аскариды, нематоды, токсоплазма, шистосома, эхинококки, трихинелла, амебы.
  2. Аллергический ринит.
  3. Крапивница.
  4. Сенная лихорадка.
  5. Аллергические заболевания.
  6. Бронхиальная астма.

Болезни, при которых снижено содержание IgE

  1. Атаксия.
  2. Телеангиоэктазии.

Иммуноглобулин D(IgD), показатели, норма

  • IgD – встречается в малых количествах у здоровых людей.
  • Увеличивается при беременности

Что такое TORCH комплекс беременных

  • Определение у беременных антител в крови к основным возбудителям, вызывающим поражение плода – токсоплазма, краснуха, цитомегаловирус, герпес, — называется TORCH комплекс.
  • Для диагностики используется метод ИФА, иммуноферментный анализ крови.

ИФА анализ, количественный и качественный метод

Иммуноферментный анализ крови выполняется различными методами. Антитела в сыворотке крови могут определять:

  • Качественно – то есть по принципу «есть», «нет», «положительно», «отрицательно».
  • Количественно – то есть в результате анализа обозначено количество найденных антител.
  • Полуколичественно – то есть, результат выдается в титрах, (максимальное разведение сыворотки, при котором еще обнаруживается положительный результат, например, «1:10»).

ИФА диагностика, преимущество метода

Использование метода иммуноферментного анализа крови имеет множество преимуществ в сравнении с другими способами диагностики:

  • Инфекция с помощью метода ИФА выявляется на самых ранних стадиях.
  • По результатам ИФА анализа можно отслеживать динамику заболевания во времени,
  • Высокий уровень точности анализа ИФА.
  • Скорость проведения диагностики.
  • Высокая чувствительность.
  • Стабильность при хранении ингредиентов.
  • Можно применять небольшое количество исследуемого материала.
  • Есть возможность автоматизации всех процессов.

Источник:
http://analyzekrovi.ru/immunologicheskie-analizy/ifa-immunofermentnyj-analiz-pokazateli