Чем отличается диагностика ПЦР от ИФА

Чем отличается диагностика ПЦР от ИФА

ИФА и ПЦР — два диагностических метода, относящихся к молекулярной биологии. Данные виды исследований биологического материала принадлежат к самым достоверным и быстрым анализам. А поэтому пользуются наибольшей популярностью, как у сотрудников лаборатории, так и у пациентов. Для выяснения отличительных особенностей методов ИФА и ПЦР понадобится изучить суть каждого исследования. Благодаря чему станет очевидным, какой диагностический метод предпочесть ПЦР или ИФА, что лучше для выявления того или иного заболевания.

Характеристика метода ПЦР

Исследование при помощи полимеразной цепной реакции относится к количественным анализам. Достоинством диагностики посредством ПЦР является тот факт, что лаборант может выявить и распознать даже одиночную ДНК возбудителя. А также возможность исследовать увеличенный ДНК участок до нескольких десятков или даже сотен раз.

Преимущества диагностики с использованием полимеразных цепных реакций:

  • Высочайшая специфичность.
  • Высокая чувствительность.
  • Определение численности возбудителей инфекции.
  • Установление типа агрессивного антигена.
  • Обнаружение одновременно нескольких видов патогенов.
  • Отслеживание результативности медикаментозной терапии.
  • Скорость получения результатов исследования с применением ПЦР (от нескольких часов до суток).

Исследования путем полимеразных цепных реакций эффективно в отношении всех без исключения возбудителей инфекции. Но есть некоторые разделы медицины, где без ПЦР не обходится постановка практически ни одного заключения. Речь идет о диагностировании инфекций, полученных половым путем.

Исследование посредством ПЦР особенно эффективно для постановки диагноза следующих заболеваний:

  • Урогенитальные инфекционные процессы.
  • Гепатиты различных типов.
  • ВИЧ-инфекции и стадии СПИД.
  • Папилломы вируса человека.
  • Туберкулез.
  • Сальмонеллез.
  • Дифтерия.
  • Хеликобактериоз и другие инфекции.

Благодаря полимеразной цепной реакции, появилась возможность выявлять инфекции, находящиеся в латентной или хронической форме. ПЦР анализ обнаруживает возбудителя инфекционного процесса на стадии, когда еще нет симптомов. Достоверность ПЦР метода самая высокая — от 99 до 100%.

На чем основана диагностика при помощи ИФА

Иммуноферментное исследование является, прежде всего, качественным анализом. Но с течением времени и усовершенствованием технологий, благодаря иммуноферментному анализу, стало возможным определять, кроме наличия или отсутствия патологических изменений в организме, вызванных конкретным возбудителем, вдобавок количество инфекционных агентов. Исследование при помощи ИФА применяется еще для выявления разнообразных онкомаркеров и стадий онкологического процесса.

А также к иммуноферментному исследованию прибегают для диагностирования заболеваний эндокринной системы и установления уровня гормонов, отвечающих за то или иное заболевание.

Иммуноферментный анализ представляет собой одно из интенсивно развивающихся течений синтетической энзимологии. ИФА сформирован на избирательном отклике специфических иммунологических взаимодействий между антигеном и антителом. Установление образовавшегося комплекса антиген-антитело выполняют с использованием особого фермента, который служит в качестве метки, регистрирующей сигнал взаимодействия.

Преимущества ИФА при диагностике патологических процессов:

  • Специфичность иммуноферментного анализа на высоком уровне.
  • Достаточная простота и чувствительность метода ИФА.
  • Высокая каталитическая активность, способствующая выявлению метки во время реакции антиген-антитело при минимальной концентрации возбудителя.
  • Стабильность при образовании комплексов антиген-антитело.

Процесс «узнавания» анализируемого комплекса чувствительным к нему иммуноглобулином осуществляется в количественном соответствии. Используется два подхода для количественной оценки анализируемых иммунных комплексов. Первая — это определение концентрации образовавшихся иммунных комплексов. А вторая — измерение концентрации не вступивших в реакцию антител.

Иммунологический метод диагностики нацелен на обнаружение иммуноглобулинов трех классов:

  1. Антитела (ИГ) М.
  2. Антитела (ИГ) А.
  3. Антитела (ИГ) G.

Сначала в организме человека в течение первых 10–15 суток появляются иммуноглобулины типа М. Далее, в ходе инфекционного процесса, к первым присоединяются антитела типа А. В более запущенных стадиях заболевания, вырабатываются иммуноглобулины G. Обнаружение при помощи иммуноферментной реакции иммуноглобулинов конкретного типа, позволяет определить, на какой стадии находится патология.

Какая диагностика лучше методом ПЦР либо ИФА

После рассмотрения особенностей каждого из анализов становится ясно, что ИФА и ПЦР диагностики уникальны и эффективны каждая по-своему. Исследования ПЦР и ИФА не могут составлять конкуренцию друг другу, но способны отлично дополнять одно другое. Особенно в случаях получения сомнительных результатов, когда симптомы свидетельствуют об одном, а лабораторное исследование о противоположном.

Бывают иногда случаи, когда анализы ИФА или ПЦР срабатывают ложно отрицательно либо ложно положительно. Постановить окончательный диагноз могут помочь дополнительные исследования, такие как иммуноблотинг для иммуноферментного анализа. Что касается полимеразной цепной реакции, то этот метод более точный, ― вот и главная разница между ПЦР и ИФА. Но это не единственное свойство, которым отличается ПЦР и ИФА.

Отличия ИФА и ПЦР диагностических методов:

  1. Иммуноферментный анализ позволяет установить лишь факт контакта организма с возбудителем инфекции. В то время как при помощи полимеразной цепной реакции возможно определить какой именно возбудитель проник в организм.
  2. Благодаря ИФА, реально подтвердить или опровергнуть факт распространенности инфекционного процесса в любом участке организма. Метод ПЦР же предназначен для обнаружения возбудителя только в исследуемом образце, то есть биологических жидкостях, фрагментах органов и тканей, которые были предоставлены для исследования.
  3. Для проведения иммуноферментного анализа пригоден абсолютно любой материал для исследования (кровь, моча, слюна, частички органов и тканей). Потому как иммуноглобулины при ответе организма на проникновение возбудителя могут находиться где угодно. Для исследования путем полимеразной цепной реакции берется тот биологический материал, где предположительно может присутствовать возбудитель.

Как видно из перечисленных особенностей каждого лабораторного исследования различия между ИФА и методом ПЦР существенные. Если коротко сформулировать, то ИФА направлен на обнаружение продуктов жизнедеятельности белков-маркеров. А ПЦР нацелен на установление конкретного возбудителя, который может относиться к группе бактерий, вирусов или грибков. Поэтому не редки случаи, когда лечащий врач может назначить одновременно оба вида диагностики как ИФА, так и ПЦР. С той лишь целью, чтобы сразу получить полномасштабную клиническую картину о происходящих патологических процессах внутри организма пациента. Чаще, чем с другими патологиями, проводится одновременное исследование методом ПЦР, а также ИФА, при инфекциях, полученных половым путем (ИППП).

Теперь, если когда-нибудь станет выбор, какой вид диагностики предпочесть ПЦР либо ИФА, у человека, ознакомившегося с предложенной информацией, вопросов не возникнет. Когда речь идет о здоровье, дабы не допустить развития инфекционного процесса до неизлечимой стадии. Лучше сделать полное обследование, чтобы обнаружить инфекцию как можно раньше и провести своевременное лечение. Либо полностью опровергнуть присутствие какого-либо возбудителя и, что называется, «спать спокойно».

Источник:
http://krov.expert/analiz/ptsr-ili-ifa.html

ИФА и ПЦР: просто о сложных лабораторных методах диагностики инфекций

Опубликовано 29 ноября 2014 пользователем a.ultanbay

В лабораторной диагностике существует множество методов выявления необходимого элемента в биоматериале. Для диагностики инфекционных заболеваний чаще всего используют два принципиально разных метода: ИФА и ПЦР. Мы предлагаем Вам ознакомиться с данными методами, чтоб понять плюсы и минусы каждого из них.

ИФА (иммуноферментный анализ) – это определение в крови пациента антител к инфекционным агентам. Антитела (иммуноглобулины, Ig) представляют собой белки, которые вырабатывает наша иммунная система в ответ на инфекцию. Для каждого возбудителя заболевания продуцируются сугубо индивидуальные антитела. Антитела «помечают» микробов, и по наличию таких «меток» на поверхности микробных клеток организм узнает цель для уничтожения. Антитела к одному возбудителю могут отличаться между собой по срокам появления:
IgM – в острый период
IgG – если процесс хронический, или в качестве постоянного иммунитета (в зависимости от вида возбудителя)
IgA – при обострении хронического процесса
Метод ИФА ищет «следы» реакции на вторжение инфекции, а не саму инфекцию!
Из-за низкой цены и использования в качестве биоматериала крови, метод применяется в качестве скрининга. Например, при подозрении на паразитозы пациенты сдают кровь на определение антител к аскаридам, лямблиям и т.д. Если результат пришел положительным, то не стоит сразу приступать к лечению паразитов – необходимо сопоставить клиническую картину, результаты ИФА и, возможно, результаты других методов обследования. Стоит помнить, что после пройденного курса лечения антитела могут оставаться в нашем организме очень долго, даже после того, как инфекция покинула наше тело, т.е. остается, так называемый, «серологический шрам».
Приведем пример: в ночном небе тысячи звезд. Многие из этих звезд уже давно погибли, но до нас до сих пор, веками, идет их свет. По сути, мы видим только след звезды. Свет есть, а звезды уже давно нет. Но если света нет, это не говорит о том, что звезды там не было.
То же самое и с антителами. Их наличие не гарантирует присутствия в организме искомого инфекционного агента. Отсутствие антител не говорит о том, что инфекции нет.
Если результат анализа методом ИФА положительный, то это значит, что нужно искать инфекцию более специфическими и дорогостоящими методами — ПЦР, бактериологические посевы. Возможен ложноположительный результат в случае, если несколько микробов обладают схожей антигенной структурой, тогда к разным микробам будут вырабатываться «похожие» антитела.

Читайте также  Паразитирующие простейшие

ПЦР – один из самых наукоемких методов. Он обнаруживает ДНК микроорганизма. Генетический материал индивидуален для любого микроба, а это значит, что метод обладает самой высокой специфичностью и не может «обознаться». Принцип ПЦР заключается в том, что в пробирке происходит многократное удвоение искомого генетического кода. В случае присутствия даже незначительного количества этого кода, произойдет увеличение его количества, и анализатор сможет «уловить» его наличие. Таким образом, ПЦР – «золотой стандарт» выявления инфекционных агентов. Однако, у этого метода есть и свои минусы. Во-первых, в отличие от ИФА, ПЦР может сказать о наличии возбудителя только в месте взятия биоматериала, которое ограничено мазком (например, с уретры или из носа). Во-вторых, за счет своей высокой чувствительности, ПЦР может обнаружить даже мертвые частицы микробов, что наблюдается сразу после лечения. В таком случае, результат будет ложноположительный.

Резюмируя вышесказанное, приведем таблицу сравнения этих двух методов друг с другом:

Источник:
http://www.kdlolymp.kz/articles/ifa-i-pcr-prosto-o-slozhnyh-laboratornyh-metodah-diagnostiki-infekciy

Что лучше и эффективней в лабораторной диагностике – ПЦР или ИФА анализ?

ПЦР и ИФА – два метода диагностики, заслужившие признание среди медицинских работников. Оба исследования из разряда молекулярной биохимии – точные и достоверные. Имеется разница между ПЦР или ИФА, что лучше и правдивей характеризует патологии? Для ответа на вопрос стоит понять суть методик, обозначить сходства и отличия диагностических способов.

Что такое ПЦР?

ПЦР – высокочувствительная полимеразная цепная реакция, которая обнаружит возбудителя болезни (вирусы, бактерии, хламидии) в организме. Методика основана на определении специфической структуры ДНК, имеющейся у инфекции. ПЦР проводится при подозрении на скрытое хроническое течение инфекционного процесса в организме, пребывающего в латентной форме. К особенностям и достоинствам ПЦР относят:

  • высокую 100% чувствительность к возбудителям любого типа с наличием уникальных фрагментов нуклеиновых кислот;
  • быстроту получения результата;
  • возможность определения численности одного вида возбудителя;
  • одновременное диагностирование нескольких возбудителей.

Лаборанты без труда с помощью полимеразноцепной реакции определяют ДНК структуру одиночного возбудителя, что дает возможность отслеживать и оценивать результаты лечения после назначения медикаментозной терапии. ПЦР, как новый метод исследования, незаменим для постановки диагноза при таких заболеваниях:

  • туберкулез;
  • дифтерия;
  • сальмонеллез;
  • ВИЧ;
  • СПИД;
  • гепатит С независимой стадии;
  • бактериоз.

ПЦР исследование

Что такое ИФА?

ИФА – иммунный метод исследования и точный анализ для выявления патологий в организме, вызванных инфекционными возбудителями. Исследование назначается при подозрении на:

  • сифилис;
  • гепатиты B, C;
  • хламидиоз;
  • токсоплазмоз;
  • цитомегаловирус;
  • вирусный герпес;
  • уреаплазмоз;
  • женский микоплазмоз.

Иммунофера позволяет выявить онкологию на раннем этапе. ИФА назначают для выявления уровня гормонов в крови, диагностики заболеваний эндокринной системы путем обнаружения онкомаркеров. Иммуноферментное исследование имеет множество достоинств:

  • простота и быстрота проведения;
  • высокая чувствительность при реакциях антиген-антитело даже на фоне незначительной концентрации возбудителя в организме;
  • высокий уровень специфичности анализа, что позволяет быстро обнаружить и установить комплекс антиген-антитело, используемый фермент послужит меткой, способной точно зафиксировать сигнал взаимодействия между ними, распознать иммуноглобулины (антитела igm, igg) в крови.

В случае инфицирования организма на начальном этапе преобладают иммуноглобулины класса М. По мере прогрессирования инфекционного процесса присоединяются антитела класса А. Если заболевание переходит в запущенную стадию, то начинается выработка иммуноглобулина класса G. Ферментная реакция иммуноглобулина выявит степень тяжести заболевания и стадию развития патологии.

Анализ ИФА на заболевания, передающиеся половым путем

Чем отличается ИФА от ПЦР?

ПЦР и иммуноферметный (ИФА) анализы одинаково востребованы в целях диагностики. Оба исследования имеют плюсы и минусы, сходства и различия.

  1. ИФА. Основное направление – обнаружение продуктов жизнедеятельности маркерных белков или установление контактов между возбудителем и иммунной системой. Опровержение либо подтверждение факта распространения инфекции в органах. Отличие ИФА от метода ПЦР – пригодность любого биоматериала для анализа: образца ткани, слюны, мочи, крови.
  2. ПЦР позволяет выявить конкретного возбудителя, относящегося к группе грибков, вирусов, бактерий. Полимеразный способ диагностики обнаружит патогенный организм в исследуемом материале: жидкость, ткань, орган. Для получения масштабной картины происходящих внутри организма патологических процессов врачи назначают сразу 2 вида анализа в комплексе. Это важно для выявления ЗПППА (патологий, передающихся при половом акте).

Чтобы с точностью установить инфекционное заболевание, передающееся половым путем, и уровень антител в крови, сначала проводится ПЦР, ведь результаты ИФА исследования неразумно брать за основу без получения первичных данных.

При выявлении антител в организме по одному ИФА нельзя сказать однозначно: протекает ли патологический процесс в организме или нет. Возможно, контакты с возбудителем были, но далеко в прошлом, и анализ может выдать ложный результат.

Нельзя делать однозначные выводы о ПЦР или ИФА, и что на самом деле достовернее. ИФА – эффективный метод диагностики, но вероятность развития заболевания может подтвердить только ПЦР, поэтому разумно проводить оба исследования совместно. ПЦР – более точный метод исследования, но в образце материала ткани и на отдельном участке тела. Несмотря на точность методики погрешности случаются нередко, ведь инфекционный процесс может быстро распространяться по организму.

Разница между исследованиями

Уследить за продвижением, например: хламидий по каналу шейки матки, бывает затруднительно. Инфекция может отсутствовать в яичниках и маточных трубах, когда тест на ИФА дает положительный ответ, а тест на ПЦР – отрицательный. Бывает, что наоборот. Для получения 100% результата оба теста на ПЦР и ИФА лучше проводить совместно.

Бывает, что результаты ПЦР или анализа ИФА не совпадают, что случается при длительном хроническом протекании инфекции или привыкании организма к ее влиянию. В данном случае ИФА – отрицательный, а ПЦР – положительный. Если в мазке немного микробов, но формируются антитела и титры долго сохраняются в крови даже после проведенного лечебного курса, то ИФА будет положительным, а ПЦР – отрицательным.

Нередко методы дают ложноположительные недостоверные ответы, когда, например: ИФА положительный, ПЦР положительный. В учет берется симптоматика пациентов, проходили ли они лечение от инфекций. Ведь бывает, что ПЦР отрицательно и ИФА отрицательно.

Разные клинические случаи требуют индивидуального подхода. Поэтому, какой анализ лучше к проведению и что точнее: ПЦР или ИФА – решение принимает лечащий врач.

Проверяться на наличие скрытых половых инфекций и сдавать анализы желательно с партнером. Ведь бывает, что у одного явно выражено течение воспалительного процесса, а у другого нет даже подозрений, что негативно отражается на половой жизни и вызывает недоверие. Всегда лучше пройти консультацию у врача и пролечиться обоим партнерам, чтобы повысить эффективность лечебного курса и сократить сроки терапии.

Например: при уреаплазмозе и микоплазмозе хорошие результаты от лечения воспалительных процессов в малом тазу можно получить только в случае прохождения совместного лечебного курса.

С учетом особенностей можно сделать вывод, что ПЦР-диагностика и ИФА отличие имеют, но оба способа способны достоверно определить наличие патологий. Однако только специалистам под силу выявить разницу между методами, выбрать реальные и правильные методы для диагностики, более точно дать расшифровку полученным результатам анализов.

Узнать подробнее о методе ПЦР можно из видеоролика:

Источник:
http://lechiserdce.ru/analiz-krovi/11029-chto-luchshe-ptsr-ili-ifa.html

ПЦР или ИФА. Когда необходимы оба исследования, а когда можно обойтись одним из них?

Давайте поговорим об одном из важнейших вопросов в диагностике инфекционных заболеваний у животных. На данную тему многое сказано и написано, но у владельцев и заводчиков до сих пор возникают вопросы и сложности. В настоящее время ИФА (иммуноферментный анализ) и ПЦР (полимеразная цепная реакция) являются наиболее достоверными методами диагностики инфекционных заболеваний у животных и человека. Основанные на последних достижениях молекулярной биологии, данные способы исследования быстро вошли в ветеринарную практику и, тем самым, значительно подняли общий уровень диагностики в целом. Каждый из этих методов позволяет оценить ситуацию с определенной стороны, в зависимости от цели, которая ставится при исследовании.

ПЦР – один из самых точных и чувствительных методов в лабораторной диагностике. Он обнаруживает макромолекулы ДНК или РНК возбудителей даже в случае присутствия незначительного их количества в пробе. Генетический материал бактериальной или вирусной инфекции индивидуален, а это значит, что метод обладает самой высокой специфичностью. Принцип ПЦР заключается в том, что происходит многократное избирательное копирование искомого участка генетического кода предполагаемой инфекции. Таким образом, ПЦР – «золотой стандарт» выявления инфекционных агентов. Важным достоинством является то, что вирусные инфекции можно обнаруживать сразу после заражения, за недели или месяцы до того, как проявятся первые симптомы. Метод ПЦР незаменим для выявления латентных (скрытых) и хронических инфекций.

Читайте также  Источником заражения человека трихинеллезом может быть

ИФА – это лабораторный иммунологический метод качественного определения и количественного измерения антител к различным возбудителям инфекций, а именно – антигенам. Также антигенами могут выступать собственные клетки организма, образующиеся в результате аутоиммунных или онкологических заболеваний. Метод ИФА обладает высокой чувствительностью и специфичностью, которая в настоящее время составляет более 90% и позволяет обнаружить реакцию организма животного на инфекционный процесс.

Достоинства ИФА — возможность диагностики через 1-3 недели после контакта с возбудителем инфекции и возможность прослеживать динамику развития заболевания.

ИФА, относясь к непрямым методам диагностики, основан на выявлении не самой инфекции, а продуктов ее жизнедеятельности в организме животного — белков–маркеров – иммуноглобулинов, которые вырабатывает иммунная система в ответ на инфекцию. Для каждого возбудителя заболевания продуцируются сугубо индивидуальные антитела, которые впоследствии и будут идентифицированы системой ИФА. Время обнаружения антител зависит как от самой инфекции, так и от особенностей иммунной системы конкретного животного.

Метод ИФА ищет «следы» реакции на вторжение инфекции, а не саму инфекцию!

Наличие иммуноглобулинов не гарантирует присутствия в организме искомого инфекционного агента.

Отсутствие антител не говорит о том, что инфекции нет.

Если результат анализа методом ИФА положительный, то это значит, что нужно искать инфекцию более специфическими методами – ПЦР, бактериологические посевы.

Определить, какой лучше сдать анализ для диагностики, в каждой конкретной ситуации может только врач, назначающий обследование. Для комплексной оценки инфекции, в некоторых случаях, может потребоваться как выявление самого возбудителя (ПЦР), так и определение антител к нему в организме животного (ИФА), с последующим контролем после проведенного лечения.

Случается, что результаты ПЦР и ИФА-диагностики могут не совпадать и в этом случае необходимо грамотно интерпретировать полученные результаты, основываясь на патогенезе предполагаемого инфекционного заболевания.

Амплификатор BIO RAD T-100

Во-первых, стоит помнить, что ПЦР может сказать о наличии возбудителя только в месте взятия биоматериала, которое ограничено (например, смывом из глаза или из носа). Для ИФА–диагностики разницы в месте нет, поскольку ИФА «реагирует» на антитела, которые вырабатываются при инфекционном процессе любой локализации. Как результат — ПЦР–диагностика дает отрицательный, а ИФА — положительный результат. Например, микроорганизмы семейства Chlamydiacеae могут локализироваться в организме животных в различных местах. И анализ ПЦР, взятый в неправильной области, ДНК хламидии не обнаружит. Но ИФА–метод все равно выявит выработку антител, сопровождающую инфекционный процесс. В таком случае необходимо сдавать оба анализа для подтверждения инфекционной природы заболевания.

Единственным ограничением продукции антител в организме при наличии инфекции может быть иммунодефицитное состояние у животного, например, при лейкозе или иммунодефиците у кошек.

Во-вторых, если результат ИФА пришел положительным, то не стоит сразу приступать к лечению инфекционного заболевания, необходимо сопоставить данный результат с клинической картиной и, возможно, результатами других методов обследования. Известно, что после пройденного курса лечения антитела могут оставаться в организме очень долго, даже после того, как инфекция покинула тело, то есть остается так называемый «серологический шрам» – след от уже перенесенной инфекции. Причем, в связи с индивидуальными особенностями иммунной системы, положительный результат ИФА–диагностики, вызванный повышенным содержанием антител, может сохраняться несколько месяцев и даже лет после полного выздоровления животного. Но возможно и обратное, например, после лечения хламидиоза, микоплазмоза – заболеваний, поражающих органы дыхания, желудочно-кишечный тракт, репродуктивные органы, уровень антител в крови значительно снижается, так как иммунитет против этих заболеваний у животных не развивается.

Следует помнить, что антитела в организме могут образовываться в ответ на недавнюю вакцинацию и высокий их уровень, очевидно, может быть связан с искусственным введением антигена в организм животного.

Немаловажно то, что материал, взятый сразу после лечения инфекции, может содержать мертвые частицы микроорганизмов, которые метод ПЦР идентифицирует за счет своей высокой чувствительности. В таком случае, результат будет ложноположительный.

Хронические инфекционные заболевания могут стать причиной разницы в результатах ИФА и ПЦР. При этом зачастую ПЦР дает положительный, а ИФА — отрицательный результат. Уставшая от хронического инфекционного процесса иммунная система может «не показать» повышенный уровень антител к инфекции. Подобное может наблюдаться и в том случае, если инфекция «свежая», даже при наличии определенных симптомов заболевания уровень антител в крови не превысит норму, поскольку они еще не начали вырабатываться. При данных ситуациях необходимы не только оба исследования, но и клинический анализ крови, и дополнительные методы оценки клеточного иммунитета.

Получение положительного результата ПЦР может быть вызвано использованием тест-систем, которые выявляют все виды бактерий, в том числе и те, которые в определенном количестве в норме содержатся в организме животного. Например, тест-система для ПЦР–диагностики настроена на выявление всех видов микроорганизмов семейства Chlamydiaceae: Chlamydophila Pneumonia, C. Psitaci, C. Abortus, C. felis. Однако хламидиями заражено примерно 18-38% собак, а клинически выраженный хламидиоз встречается в спорадических случаях. Носительство хламидий выявляется также у 65-70 % кошек. Кошки – латентные носители возбудителя (содержится в слюне, моче, экскрементах, на лапках внешне здоровых животных). Поэтому положительный результат ПЦР–анализа в таком случае должен быть правильно интерпретирован врачом, согласован с материалом исследования, картиной заболевания и, обязательно, ИФА – диагностикой крови пациента.

Другой пример: у кошек встречается несколько видов микроорганизмов рода Mycoplasma, чаще всего М. felis и М. gatae. Это частые обитатели слизистых оболочек, М. felis и М. gatae обнаруживаются у 70-80% здоровых кошек. Предполагается, что М. felis может быть патогенной, а М. gatae – естественный коммерсал конъюнктивы и верхних дыхательных путей кошек (то есть безвредная микрофлора). При проведении ПЦР–анализа результат может быть положительным, а ИФА – отрицательным, вследствие отсутствия специфической реакции организма на присутствующую условно-патогенную микрофлору, следовательно, возможное заболевание, например, конъюнктивы глаз было вызвано не данным микроорганизмом.

Ветеринарному врачу необходимо понимать патогенез того или иного заболевания, так коронавирусная инфекция кошек, вызываемая семейством Coronaviridae, а именно штаммами FIPV, подавляет иммунитет, и антитела к возбудителю могут и не обнаруживаться. Положительный результат ИФА говорит о наличии в организме коронавируса, но не дает информации о том, где этот вирус находится – в кишечнике или в тканях.

В связи с этим важным является непосредственное выявление возбудителя заболевания – ПЦР. Однако использование метода ПЦР не может позволить провести дифференциацию условно-патогенных и патогенных штаммов в организме и отличить состояние носительства от заболевания, вызывающего тяжелый перитонит, как прави­ло, с летальным исходом. Положительный ответ ПЦР при выделении вируса с фекалиями говорит о том, что животное в данный момент представляет опасность для окружающих кошек. Согласно ряду исследований, некоторые кошки, в организме которых еще находится вирус, перестают распространять его в течение нескольких недель. Но есть вероятность длительного вирусоносительства, с повторяющимися периодами выделения вируса во внешнюю среду со слюной и фекальными массами.

Подводя итоги, можно сказать, что и ИФА, и ПЦР–анализы сами по себе не являются панацеей в диагностике инфекций. Нельзя одной ПЦР или ИФА–диагностикой заменить все существующие методы исследования, ими можно лишь дополнить их, позволив всем методам достигнуть реальных, точных, достоверных результатов.

Заведущая лабораторий – Тосторожева А.Б. ВЛДОЦ СТАТУС. Март 2017 г.

Источник:
http://vetstatus.com/?p=1978

Чем отличается анализ ифа от пцр

Появление большого количества заболеваний, в том числе иммунных и инфекционных, спровоцировало появление огромного количества тестов для их выявления. Больше всего успехов наблюдается в молекулярной биологии. Именно к этой отрасли и относятся анализы ИФА и ПЦР.

Для того чтобы выяснить отличия между ПЦР и ИФА, а также их сходства, необходимо рассмотреть в отдельности каждое обследование.

Методика обнаружения ИФА

ИФА — это иммуноферментный анализ, который проводится в лаборатории и основан на избирательной реакции специфических иммунологических реакций в паре антиген-антитело.

Читайте также  Полисорб и активированный уголь, Полисорб МП

Для того чтобы провести ИФА-диагностику, необходимо сдать кровь, над которой проведут исследования и смогут выяснить, есть ли в организме возбудители инфекций.

Наиболее часто встречающиеся инфекции можно представить в виде списка, в который входят в основном половые заболевания:

  • сифилис;
  • вирус иммунодефицита человека или ВИЧ;
  • гепатит;
  • хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз;
  • инфекция цитомегаловируса;
  • герпес.

Кроме того, по результатам ИФА возможно определить и другие инфекционные заболевания, уровень гормонов, антител и даже начальные стадии онкозаболеваний.

Главное, чем отличается ИФА от ПЦР заключается в том, что результаты метода ИФА нельзя использовать как первичные данные. Перед выяснением инфекционных заболеваний, передающихся половым путем, и уровня антител в крови стоит провести анализ ПЦР.

Как исключение, можно назвать только анализ на сифилис, но и здесь нужно проводить метод ИФА в комплексе с микропреципитацией.

Также ИФА отличается тем, что даже если по результатам найдены антитела в организме человека, то нельзя однозначно сказать, что человек болен, так как их наличие может говорить только о контакте с возбудителем в недавнем времени (иногда в далеком прошлом).

Даже, несмотря на то что метод ИФА не очень достоверный, есть вероятность, что ряд заболеваний не выяснит и ПЦР. К таким заболеваниям относят незаметные для иммунной системы человека болезни, например, уреаплазмоз, микоплазмоз или трихомонада.

Метод обнаружения ПЦР

ПЦР — это полимеразная цепная реакция, которая относится к методам молекулярной диагностики и так называемого золотого стандарта. Именно этот метод является наиболее точным в определении иммунных заболеваний, передающихся половым путем. А является он настолько действенным благодаря проверке временем и многоразовым тщательным клиническим апробированиям, обследованию не одной тысячи людей.

Важным отличием является то, что для изучения ПЦР используется клинический материал больного или материал, полученный из внешней среды, которой является вода или почва.

Метод ПЦР лучше тем, что даже если в пробе есть несколько молекул ДНК, которые принадлежали возбудителю инфекции, как результат все равно будет найдено заболевание.

Еще одной особенностью этого метода считается и то, что можно определить и медленно развивающиеся заболевания. Кроме того, не нужно использовать трудоемкие микробиологические методы.

Наиболее часто при помощи ПЦР определяются гинекологические, урологические заболевания, такие как:

  • урогенитальные инфекции, которые передаются половым путем;
  • гепатит;
  • вирус иммунодефицита человека или ВИЧ;
  • папилломы;
  • туберкулез;
  • хеликобактериоз;
  • сальмонеллез;
  • дифтерия.

Хоть и полагают, что метод ПЦР дает наиболее точные данные обследования, но это касается только той части материала (ткани), клеточный материал которого берется на обследование. Таким образом, даже в этом методе возникают погрешности и затруднения в диагнозе, которые связаны со скоростью распространения болезни.

Как пример можно привести наличие хламидий в канале шейке матки, но их отсутствие в маточных трубах, ткани яичников и т. д.

Результат рассмотрения ПЦР или ИФА

Главное отличие между ПЦР и ИФА заключается в оборудовании для проверки и используемом материале. Из-за этого и может возникнуть ситуация, в которой ИФА-тест будет положительным, а ПЦР-тест отрицательным или наоборот.

Например, взяли ПЦР из области предполагаемой инфекции, а ИФА в любом другом месте организма (поскольку для этого теста нет разницы в месте, так как антитела есть везде, а ИФА реагирует именно на них). Далее проводят тест, и результат ПЦР показывает, что заболевания нет, а ИФА дает положительный ответ. Это будет обозначать, что вирус в организме есть, но не конкретно в той части ткани, которую исследовали при методе ПЦР.

Таким образом, важно запомнить то, что выбирать лучшее между ПЦР или ИФА не стоит, а стоит делать совместно два теста и получать 100% результат.

Также можно отметить, что ПЦР — это достоверная информация о зараженном (инфицированном) участке (конкретной ткани), которая получена благодаря высокой чувствительности. А ИФА — косвенный метод получения информации о состоянии всего организма и наличия в нем инфекции, а еще о процессе инфицирования вовлеченных тканей и органов, которые не подлежат прямой диагностике. Кроме видимых расхождений, есть и кое-что общее в этих двух методах. Например, высокая скорость получения результата и универсальность, результаты которых можно проверить уже через 4 или 5 часов.

Более подробную информацию о том, чем отличается обследование ИФА от ПЦР, какой метод лучше для человека и его организма, в частности, или конкретно для его заболевания, выбирает доктор. Так что лучше обратиться к врачу за направлением на проведение анализа, чем заниматься самолечением, поскольку иногда даже личное желание провериться чаще чем нужно приводит к неожиданным последствиям, ведь каждый анализ крови и тканей несет за собой последствия и если переусердствовать, то они будут непредвиденными.

Источник:
http://101analiz.ru/krov/analiz-ifa-pcr.html

В МОЗ Украины объяснили, как и кому будут проводить тесты иммуно-ферментного анализа

В Минздраве рассказали, что из себя представляют тесты иммуно-ферментного анализа (ИФА) на коронавирус, а также, кому и в каких случаях их будут проводить.

Об этом сообщил Центр общественного здоровья в Facebook.

Иммуно-ферментный анализ подразумевает под собой поиск антител к коронавирусу на ранней или поздней стадии заболевания, когда ПЦР тесты показывают слабый или отрицательный результат. Метод ИФА-тестирования определяет иммуноглобулины двух типов: M и G. Если оказывается M, то это говорит об остром процессе заболевания, если G — это человек переболел или заразился вирусом и выработались антитела к этому заболеванию.

Использование ИФА-тестов для выявления антител COVID-19 было урегулировано приказом Минздрава от 20 мая 2020 года постановлением № 1227. Однако в первую очередь для постановки диагноза будут, как и ранее, использоваться результаты ПЦР-тестов.

Дело в том, что после реагирования иммунитета на попадание вируса в организм, контагиозность (заразность) вируса падает. В течение первой недели после первых симптомов точность ПЦР-теста практически стопроцентная, однако после этой недели и в период до появления симптомов данный тип анализов может давать неточные результаты.

Так, ИФА-тестирование может проводиться пациентам с симптомами коронавируса, пациентам с пневмонией, контактным лицам, лицам, нуждающимся в плановой госпитализации или операции. Однако сначала проводить ИФА, а потом, в случае подозрительных результатов, подтверждать их методом ПЦР, будут медицинским работникам, работающим с больным COVID-19 работникам лабораторий, которые обрабатывают образцы на коронавирус, работникам патологоанатомических, судебно-медицинских бюро, отделений, принимающих участие во вскрытии тела, в том числе взятии образцов секционного материала, работники Национальной полиции, Национальной гвардии, Госпогранслужбы и другим медицинским и фармацевтическим работникам.

Учитывая, что медики, работники Нацгвардии и Нацполиции должны проходить диагностику регулярно, ИФА-тестирование поможет снизить нагрузку на ПЦР-исследования. Кроме того, планируется проведение тестов иммуно-ферментного анализа для тех пациентов, которые имеют симптомы COVID-19, но результаты ПЦР тестов для них дали отрицательный результат.

Что касается отличий между ИФА и ПЦР-тестами, то для проведения ИФА-тестирования необходимы лабораторные условия и специальное оборудование. При этом, анализируется сыворотка крови, а не сама кровь, как в случае с экспресс-тестами, и не материалы мазков, как в случае ПЦР.

ИФА-тест выявляет иммунную реакцию на вирус — уровень антител. Экспресс-тесты также выявляют антитела в организме в ответ на антиген, однако имеют низкую чувствительность и специфичность по сравнению с ИФА-тестами.

ПЦР-исследование выявляет вирус, то есть его генетический материал. Таким образом, положительный результат ИФА-теста является дополнительным основанием для проведения ПЦР-исследования.

Напомним, Минздрав утвердил категории лиц, которых необходимо тестировать на антитела к коронавирусу: Пациенты с клиническими признаками коронавирусной болезни и пациенты с пневмонией; контактные лица; нуждающиеся в плановой госпитализации или операции; контактирующие с больными или их биоматриалами по долгу врачебной службы; полицейские.

Как сообщала «Страна», украинцев начнут тестировать на антитела к коронавирусу. Приказ об этом подписал Минздрав. Такие тесты показывают: если человек уже переболел Covid-19, он может иметь иммунитет.

Источник:
http://strana.ua/news/269553-chem-otlichajutsja-testy-ifa-na-koronavirus-ot-ptsr-testov.html