Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ

Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.

ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.

Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.

Спецпредложения, скидки и акции помогут существенно сэкономить на медицинском обследовании.

Контроль качества лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, — дополнительная гарантия точности результатов анализов.

Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.

Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).

Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.

Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.

Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.

Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).

Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.

Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.

Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.

ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.

Преимущества метода

Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.

ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.

Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Недостатки метода

К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.

В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.

ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Показания к назначению и выявляемые заболевания

Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:

  1. Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
    • IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
    • IgG к ВИЧ;
    • Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
    • Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
    • Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
    • Ig M и IgG к токсоплазмозу;
    • Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
    • IgG к паразитарным заболеваниям;
    • Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
    • IgG к хеликобактерной инфекции.
  2. Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.
  3. Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).
  4. Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).

Анализируемый биоматериал и особенности его забора

Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.

Сроки готовности результатов ИФА

При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.

Расшифровка иммуноферментного анализа

Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Анализируемые показатели

  • IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
  • IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
  • IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
  • IgG говорит либо о хронизации заболевания, либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

Возможные результаты ИФА

В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.

Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.

Где можно сдать биоматериала на иммуноферментный анализ?

Информативность ИФА делает этот анализ важным инструментом в работе многих медицинских центров. Но можно ли доверять такую диагностику государственным лабораториям или лучше самим выбрать, где провести такое исследование?

«Хронические инфекции — большая проблема современной медицины. Когда по разным причинам не удается вовремя поставить диагноз, болезнь переходит в вялотекующую стадию и постепенно подтачивает организм, — рассказывает специалист сети независимых лабораторий «ИНВИТРО». — В поликлиниках и стационарах, работающих в рамках общественной системы здравоохранения, не всегда есть ресурсы для целенаправленного поиска таких инфекций, поэтому бывает, что врачи предоставляют разбираться с проблемой самостоятельно. Но не стоит обращаться в первую попавшуюся частную лабораторию, конечно, если вам не нужен сомнительный результат, который никак не поможет в диагностике. Только те медицинские центры, которые работают в соответствии с международными стандартами качества, могут провести ИФА по всем правилам, избежав ошибок и искажений в процессе анализа. Так, наша лаборатория «ИНВИТРО» одной из первых предложила пациентам проведение ИФА в частном порядке, и за минувшие двадцать лет мы завоевали безупречную репутацию и помогли сотням тысяч человек».

Источник:
http://www.kp.ru/guide/immunofermentnyi-analiz.html

Анализ ИФА: что это такое? зачем он нужен? плюсы и минусы метода

Анализ ИФА – что это такое? Полное наименование этого метода диагностики называется иммуноферментный анализ крови, и он основан на определении в периферической крови антител различных классов, или иммуноглобулинов, которые вырабатывает человеческий организм.

В практике врача ИФА – анализ занимает очень важное место, когда нужно диагностировать какую – либо инфекционную патологию. Этот анализ показывает не только факт наличия инфекционного заболевания, но так же и стадии патологического процесса. Также не только в отношении возбудителя метод ИФА показан к применению: он используется для диагностики аллергических состояний. Этот тест позволяет выявить проблемы в системе иммунитета, при многих заболеваниях кроветворной системы, аутоиммунных и других расстройствах.

Зачем нужен ИФА?

Все исследователи склоняются к тому, что название «антитело» выбрано слишком неудачно. Но все-таки оно отражает одну важную особенность иммуноглобулинов: они способны связывать и нейтрализовывать вредные вещества, подходя к ним как «ключик» к «замочку». Количество антител в крови отражает не только общую способность организма к защите от инфекций, но так же и способность к образованию циркулирующих иммунных комплексов, которые могут возникнуть при различных аутоиммунных болезнях, например, при ревматоидном артрите или болезни Бехтерева.

Комплексы антител с антигеном (вредным фактором инфекционной природы) – это результат ответной реакции организма на внедрение «чужаков». Поэтому иммунитет учится распознавать их, с помощью лимфоцитов обучает иммунокомпетентные клетки, и они способны продуцировать высокоспецифичные антитела. Так, антитела к вирусу Эпштейна устроены иначе, чем антитела к вирусному гепатиту С, или к кишечной палочке, а anti-HAV, или антитела к вирусу гепатита А – иначе, чем аутоантитела к хрящевой ткани. Именно высокая специфичность, и соответствие иммуноглобулинов инфекционному возбудителю и делает высокую ценность такому лабораторному исследованию, как иммуноферментный анализ крови.

Читайте также  Как правильно сдавать кал на яйца глист ребенку или взрослым

После прочной связи антител и антигенов в единый комплекс (антиген-антитело) вредные факторы утрачивают свою способность к повреждению тканей организма, и затем эти комплексы или нейтрализуются, или лизируются с помощью фагоцитоза нейтрофилами, и, «перевариваясь», покидают организм.

Анализ крови ИФА может показать, с каким определенным болезнетворным фактором сталкивается наш организм, на какой стадии находится процесс взаимодействия организма с инфекцией. После проведенного исследования врач может с высокой степенью уверенности сделать прогноз, назначить определенные виды лечения, а в некоторых случаях даже может определить продолжительность жизни пациента, особенно при хронических вирусных инфекциях, например, при вирусном гепатите С.

Но в некотором случае, в организме вообще нет никаких инфекционных агентов, и антитела по «ошибке» набрасываются на собственные органы и ткани, поскольку иммунокомпетентные клетки получили ложную информацию. Такие заболевания называют аутоиммунными, и иммуноферментный анализ крови также помогает распознать эту хроническую патологию, и помочь в диагностике.

Подробнее об иммуноглобулинах

Всего человеческий организм вырабатывает 5 известных классов антител, которые обозначаются Ig (что расшифровывается как иммуноглобулины), которые принадлежат классам A, M, G, E, и D. Все они имеют большое значение в интерпретации результатов ИФА – анализа. Конечно, комплексов значительно больше, и далеко не все они еще открыты. Но в диагностике разных болезней наиболее ценны первые три типа антител. Анализ крови на ИФА использует максимум информации: момент появления антител в крови, изменение их концентрации в зависимости от времени, срок исчезновения, а также тип специфических антител.

Так, участниками первичного, острого инфекционного процесса являются иммуноглобулины класса М, которые всегда свидетельствуют об острой фазе, даже в том случае, когда клинически болезнь протекает стерто. Характерный пример – безжелтушная форма острого вирусного гепатита В или С. Иммуноферментный анализ крови на гепатиты покажет, что у человека есть острый гепатит, и такие симптомы, как боли в подреберье, сухость во рту, ломота в суставах и другие неспецифические симптомы становятся легко понятными.

Спустя несколько недель эти антитела обнаруживаются во все более исчезающей концентрации, уступая иммуноглобулинам класса G. Они определяются в крови долгие месяцы, и даже годы, и свидетельствуют или о выздоровлении, и тогда могут оставаться пожизненно, формируя прочный иммунитет. Это свидетельствует о мощной защите от антигенов возбудителей. Так, именно антитела этого класса делают человека невосприимчивым к повторным случаям заболевания сибирской язвой и чумой. Но бывают случаи, когда эти антитела не препятствуют при наличии антигенов их вредному влиянию. В таком случае речь может идти о повышении активности хронического процесса.

Что касается IgE, то он имеет применение в диагностике различных паразитарных инвазий и аллергических состояний, а IgD выполняет вспомогательную функцию: метод иммуноферментного анализа позволяет использовать его в комплексной диагностике бронхиальной астмы и аутоиммунных состояний. Конечно, расшифровка ИФА-анализа значительно более сложная, и специалисты – иммунологи могут рассказать гораздо больше. По каким же показаниям пациент может самостоятельно обратиться в лабораторию, чтобы выполнить исследования?

Показания к анализу

Прежде всего, нужно понять, что нет такого анализа – «просто кровь на ИФА». Бывает анализ на гепатиты, бывает – на уреаплазму, или на сифилис. Таким образом, сдавать кровь на ИФА можно только прицельно, «заказав» поиск нужной инфекции. Просто так непонятно, зачем сдавать кровь из вены, не зная, что нужно искать. Вот почему метод иммуноферментного анализа – это мощный инструмент, который важен в диагностическом поиске. Только врач может назначить этот анализ, поскольку он целенаправленно ищет инфекцию, для которой характерны данные симптомы. Обычный человек, конечно, может заказать 150 анализов крови методом ИФА на «все инфекции», но это будет неразумным и затратным подходом к диагностике, сдавая анализы на все подряд.

Наиболее востребовано назначение этих анализов при следующих заболеваниях и состояниях:

Различные микробные и вирусные инфекции, симптомы инфекционных заболеваний – сыпь, лихорадка, желтуха, увеличение лимфоузлов, синдром диареи, подозрения на заболевания, передающиеся половым путем.

Помогает методика ИФА при определении уреаплазмы и микоплазмы, сифилиса и хламидиоза, туберкулеза и цитомегаловирусной инфекции, герпеса, вирусных гепатитов и вируса Эпштейн-Барра. В настоящее время около 500 различных инфекций можно верифицировать с помощью метода иммуноферментного анализа,

При подозрении на глистные инвазии, и наличии таких симптомов, как аллергия, эозинофилия в крови, кожный зуд, диспепсия и похудение,

Подробнее о данном виде исследования читайте в статье «Анализ крови на глисты и паразиты: методы исследований, ИФА, кому и как сдавать?».

При выявлении аллергенов, которые вызывают отек Квинке, крапивницу, одышку и приступы астматического удушья.

В этом случае выявляются конкретные Ig E, и существуют целые аллергопанели, которые помогут точно определить аллерген – кальмары или креветки, сухой корм для рыбок, содержащий дафнии, домашнюю пыль. При поллинозе этот метод позволяет найти точно тот злак, кустарник или дерево, который вызывает весеннее чихание и слезотечение,

  • Показан этот метод при подозрении на аутоиммунные заболевания, которые лечат врачи-ревматологи,
  • При подозрении на опухолевый рост и активность,
  • В комплексной диагностике иммунодефицитных состояний и ВИЧ – инфекции,
  • При заболеваниях крови и в трансплантологии, для комплексной оценки иммунитета, например, перед пересадкой печени или почек.

Теперь мы знаем, зачем нужно сдавать кровь на ИФА. Выясним, как проводится это исследование.

Как выполняется анализ?

Классический материал – это венозная кровь пациента. Но при необходимости, можно исследовать самую разную жидкость и ткань: слизь, слюну, цервикальный секрет, цереброспинальную жидкость, стекловидное тело глаза, содержимое пупочного канатика и околоплодные воды. Важно помнить, что прием различных лекарств, избыточная физическая активность, злоупотребление алкоголем, может сильно исказить результаты анализов.

Существуют несколько методов, которые позволяют проводить этот анализ. Чаще всего в клинических лабораториях используют фотометрический способ. При этом используют меченые краской вещества, после реакции которых, и маркировки комплекса антиген-антитело изменяется их окраска. В результате изменяется и оптическая плотность раствора, и это изменение прямо пропорционально концентрации обнаруженных антител. Лабораторные спектрофотометры успешно используются для измерения этих отклонений.

Также для проведения ИФА используется флуориметрический метод, основой которого является флуоресценция. Здесь тоже высчитывается интенсивность флуоресцирующих веществ, которые осели на исследуемых образцах.

Наконец, в иммунологическом анализе используют электрохимические способы определения активности ферментов, которые являются особыми метками для антигенов и антител. Сам иммуноферментный метод чаще всего подразумевает использование таких ферментов, как щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена и галактозидаза. Эти ферменты способны связываться с антителами или антигенами и маркировать их вследствие своей активности.

Минусы метода и его плюсы

К очевидным «плюсам» можно отнести демократичную себестоимость анализа, возможность его скринингового использования у широких групп населения, например, при обследовании беременных на ВИЧ. Метод иммуноферментного анализа достаточно спецефичен, и может применяться для контроля качества лечения многих заболеваний. Немаловажно, что анализ готовится быстро, и является простым и безопасным для пациента.

Существует, однако, много «подводных камней». Так, если иммуноглобулины не выявлены, то это еще не говорит о 100% отсутствии заболевания. Ведь на фоне иммунодефицита у организма просто может не «быть сил» на синтез антител. Если у пациента тяжелая печеночная недостаточность, то печень просто не в силах синтезировать белок – строительный материал для антител. В таком случае результат называют серонегативным, и требуется подтверждение инфекции уже прямым и самым совершенным методом исследования – ПЦР, или полимеразной цепной реакцией. В отличие от иммуноферментного анализа, при этом методе выявляется не реакция организма на инфекционный процесс (которая может быть дефектной, или отсутствовать вовсе), при ПЦР определяется непосредственно наследственный материал, или находится сам возбудитель.

Метод иммуноферментного анализа может дать ошибку на фоне многих хронических болезней, на фоне иммуносупрессивной терапии. В гельминтологии же и паразитологии существует закон: только обнаружение паразита, или его яиц, является абсолютно надежным способом постановки диагноза. ИФА может давать перекрестные и ложноположительные методы, реагируя на многие нормальные события в жизни пациента.

В заключение нужно сказать, что метод иммуноферментного анализа является мощным, но вспомогательным способом лабораторной диагностики многих заболеваний. Но в любом случае, диагноз должен выставляться на основании многих факторов: жалоб и анамнеза пациента, данных осмотра, других вспомогательных и инструментальных методов диагностики.

Источник:
http://kardiobit.ru/analizy/analizy-krovi/analiz-ifa-chto-eto-takoe-zachem-on-nuzhen-plyusy-i-minusy-metoda

Сдача крови на ИФА: что это?

В настоящее время есть много типов анализов крови, по которым врач может определить состояние здоровья пациента. Почему именно приоритетное место в них занимает анализ ИФА, читайте в данной статье.

ИФА анализ крови

ИФА (иммуноферментный анализ) производится в лабораторных условиях для того, чтобы выявить степень защиты организма, а именно его функций. В ходе такой процедуры специалист может определить свойства и количество клеток, а также наличие антител в организме. Такое тестирование может быть проведено для диагностирования аутоиммунных, гематологических или инфекционных заболеваний.

Так что это такое ИФА? В ходе такого обследования можно выявить антитела в крови. Может проводиться также для выявления уровня гормонов или для иных иммунологических комплексов.

Чтобы провести такое исследование крови ИФА, должны быть определенные показания для этого. Их обычно выявляет врач, который и проводит лечение.

Кровь может браться на анализ в таких случаях:

  1. Для диагностирования инфекций, которые могут передаваться половым путем (сифилис, хламидиоз и прочие).
  2. Для диагностирования наличия вирусных инфекций (гепатит, герпес и прочие).
  3. Для выявления количества и качества гормонов в теле.
  4. Для диагностирования онкологического заболевания.
  5. Для определения уровня иммунодефицита.
  6. Для диагностирования организма на наличие тех или иных заболеваний при пересадке органов.
  7. Для оценки эффективности проводимой терапии.

В основе данного принципа анализа лежит то, что при помощи его можно выявить в организме иммуноглобулины (белковые антитела). Такие тела вырабатываются организмом, а именно иммунной системой, когда в тело попадает инфекция. Такие вещества, которые вырабатывает организм, способны связываться с возбудителями инфекции и нейтрализовать их в процессе этого.

Классификация антител, которые борются с инфекцией в организме

Иммуноглобулины имеют особую характеристику. Это специфичность, чем и отличаются от других антител. Благодаря такой своей способности они могут связываться с другими антигенами, образовывая комплексное антитело. Именно при анализе ИФА и можно выявить такие тела в крови. В настоящее время специалисты различают иммуноглобулины пяти типов.

Обычно же их делят на три класса:

Такие антитела могут накапливаться в организме человека при попадании в него инфекции. При этом появляются они в разное время после инфицирования.

Самые первые, которые появляются в крови после инфицирования, это антитела класса М. Они образуются на пятый день после заражения. Находятся в теле они 20-24 дня, а потом исчезают. Такие антитела могут указывать на то, что инфекция в организме острая или уже перешла в хроническую стадию. Это дает врачу информацию о том, что надо незамедлительно начинать процесс лечения.

Через 20-25 дней после появления заражения появляются тела G. Внутри человека они могут находиться на протяжении двух лет. Если при сдаче тестов два раза подряд будут выявлены эти антитела в крови (между анализами промежуток составляет 2-3 недели), то это говорит врачу, что инфекция в организме протекает повторно. То есть, человек еще раз заразился подобной инфекцией.

Читайте также по теме

Тела класса А можно обнаружить в организме через 2-3 недели после инфицирования или обострения болезни. Тут следует отметить, что только 20% этих тел могут находиться в крови. Все остальные же в это время будут располагаться на слизистых. Полностью исчезают такие антитела через 3-7 недель после того, как они уничтожат тела инфекции. Если их при проведении анализа не будет обнаружено в теле, то это говорит о том, что инфекции нет в организме. Если на протяжении определенного срока в организме еще будут обнаружены данные антитела, то это может сказать о том, что заболевание стало уже хроническое.

Чтобы провести тестирование ИФА, берется кровь у пациента. Есть также возможность проводить данные исследования и при взятии другого материала, например, околоплодных вод или спинномозгового вещества. Кровь обычно берется для тестирования из вены.

Читайте также  Кустарник паразит

Специалисты советуют данные тесты сдавать на голодный желудок. После употребления еды должно пройти 10-12 часов. Также, если клиент употребляет какие-либо лекарственные препараты при сдаче анализа ИФА, то он должен сообщить об этом своему лечащему врачу. Это может повлиять на точность тестирования. На достоверность тестирования влияет спиртное или наркотики. Их не следует употреблять на протяжении 3-5 дней перед сдачей анализов.

После проведения исследования сданного материала врач ставит диагноз. Он может быть положительным (+) или отрицательным (-). Такие оценки ставятся по каждому классу иммуноглобулинов.

Преимущества ИФА анализа крови

Специалисты отмечают, что данный тип тестирования крови сегодня наиболее распространенный и популярный. Он имеет массу плюсов перед другими видами тестирования.

Вот некоторые из них:

  1. Возможность провести диагностирование крови на ранних стадиях заболевания.
  2. Точность исследования.
  3. Возможность отслеживания тенденции проявления инфекции.
  4. Возможность проводить массовые исследования, так как уровень унификации тут высокий.
  5. Для возможности получения максимально правильного и точного результата потребуется мало времени.
  6. Удобство проведения анализа.
  7. Автоматизация некоторых процессов в лаборатории.
  8. Небольшая стоимость тестирования.

Также у этого способа диагностирования есть и свои недостатки. К таким можно отнести то, что результат тестирования иногда может быть ложным. Это не зависит от того, положительный он или отрицательный. Происходит такая ошибка по техническим причинам или сбоям, которые может давать оборудование. Также неточность результатов может зависеть и от состояния здоровья пациента, например, наличие у него хронического заболевания или прием определенных лекарственных препаратов.

Также стоит отметить, что на качество тестирования влияет и специализация доктора. Поэтому рекомендуется все анализы сдавать и проводить только в присутствии квалифицированного врача и в лабораторных условиях. Зная эти моменты, вам будет проще принять правильное решение при необходимости сдачи крови на анализ ИФА.

Источник:
http://testanaliz.ru/krov-na-ifa

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

Что такое ИФА

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Виды иммуноглобулинов

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

необходимы для иммунного ответа

способны связать 5 молекул антигена,

нужны для формирования раннего иммунитета

Образование местного иммунитета

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

Показания к сдаче анализа на иммуноглобулины

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

  • вирусный гепатит;
  • ВИЧ-инфекция;
  • цитомегаловирус,
  • вирус Эпштейна-Барр,
  • вирус герпеса,
  • корь
  • краснуха,
  • туберкулез,
  • сальмонеллёз,
  • дизентерия,
  • клещевой энцефалит,
  • бактерии хеликобактер,
  • боррелиоз,
  • столбняк,
  • сифилис,
  • дифтерия,
  • лептоспироз,
  • хламидиоза,
  • уреаплазмоз,
  • микоплазмоз,
  • коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

  • плоскими червями
  • аскаридами
  • гистолическими амебами,
  • печеночными тремадами,
  • лямблиями,
  • токсоплазмами,
  • трихинеллами,
  • двуусткой,
  • цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

Подготовка к сдаче анализа

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

  • за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
  • не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
  • стараться не допускать стрессов,

Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

  • прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.
  • Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

    Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

    Порядок взятия пробы

    В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

    Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

    Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

    Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

    Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

    Как делают анализ

    После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

    Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

    • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
    • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
    • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

    В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

    Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

    При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

    Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

    После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

    При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

    Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

    Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

    Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

    Когда будет готов анализ

    Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

    Результаты теста и их расшифровка

    На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

    Возможны различные интерпретации результатов:

    1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
    2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
    3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
    4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
    5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
    6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

    Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

    • вирусный гепатит;
    • цитомегаловирус;
    • герпес;
    • ветряная оспа;
    • хламидиозом;
    • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

    Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

    Источник:
    http://healthperfect.ru/ifa-analiz.html

    ИФА анализ крови

    Иммуноферментный анализ крови (ИФА) проводится для комплексной оценки защитных функций организма. В ходе проведения исследования определяется количество и свойства иммунных клеток, присутствие необходимых антител. ИФА анализ крови проводится для диагностики инфекционных, гематологических, аутоиммунных заболеваний, первичных и вторичных иммунодефицитов. Рассмотрим, что собой представляет анализ крови методом ИФА, и какие показания существуют для проведения данного исследования.

    Что это такое

    Анализ крови методом ИФА является лабораторным методом, с помощью которого в пробе крови определяют антитела или антигены. Данное исследование используется для выявления уровня иммуноглобулинов, иммунологических комплексов, гормонов.

    Показания к анализу

    Для назначения ИФА анализа крови существуют следующие показания:

    • диагностика инфекций, которые передаются половым путем – уреаплазма, микоплазма, хламидиоз, трихомонада, сифилис;
    • диагностирование вирусных заболеваний – цитомегаловирус, герпес, гепатиты, Эпштейн-Барр вирус;
    • определение уровня гормонов;
    • диагностика онкологических заболеваний;
    • определение иммунодефицита;
    • диагностирование аллергий;
    • предоперационное комплексное обследование перед пересадкой органов;
    • оценка эффективности терапии.

    Принцип метода

    Принцип действия метода иммуноферментного анализа основан на определении в крови специфических белков-антител – иммуноглобулинов. Иммуноглобулины вырабатываются иммунной системой человека при проникновении в организм антигенов (чужеродных микроорганизмов). Такие иммунные молекулы связываются с множеством инфекционных возбудителей в организме и нейтрализуют их.

    Иммуноглобулины обладают важной характеристикой – специфичностью. Благодаря этому они могут связываться с определенным антигеном, образуя комплекс антиген-антитело. Во время проведения ИФА анализа крови именно этот комплекс определяют качественно и количественно.

    Различают иммуноглобулины пяти классов. Но обычно определяют три класса – иммуноглобулины A, M, G. Данные антитела накапливаются в организме в разное время от момента инфицирования.

    • Иммуноглобулины класса М (IgM) появляются в крови самыми первыми на пятые сутки от момента заражения. Они находятся в организме на протяжении 5–6 недель, затем исчезают из кровотока. Антитела IgM указывают на острый период заболевания или обострение болезни при ее хроническом течении.
    • Примерно через 3–4 недели со времени заражения в крови появляются иммуноглобулины класса G (IgG). Они могут существовать в крови человека несколько месяцев или даже лет. Согласно расшифровке ИФА анализа крови, если в двух пробах крови, взятых последовательно через две недели, увеличено количество иммуноглобулинов IgG, говорят о текущей инфекции или реинфекции – повторном заражении той же инфекцией.
    • Иммуноглобулины класса А (IgA) можно выявить данным методом исследования через 2–4 недели после заражения или обострения инфекционной болезни. Из них только 20% циркулирует в крови, остальные находятся в секрете слизистых оболочек. Антитела IgA исчезают из кровотока через 2–8 недель после уничтожения инфекционных агентов. Исчезновение данных иммуноглобулинов означает излечение от инфекции. Если после окончания болезни определено присутствие в крови антител IgA, значит, заболевание перешло в хроническую стадию.

    Подготовка к анализу

    Для проведения анализа крови методом ИФА чаще всего используют кровь человека. Но исследовать также можно содержимое стекловидного тела, спинномозговую жидкость, околоплодные воды.

    Проба крови для исследования берется у пациента из локтевой вены. Сдавать кровь рекомендуется натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти не меньше 12 часов). Необходимо сообщить врачу, если пациент принимает лекарственные препараты, так как некоторые из них могут изменить результат анализа. На достоверность результатов исследования влияет прием алкоголя и наркотиков.

    Расшифровка

    В бланке результата данного анализа указывается положительный (+) или отрицательный (-) результат определения каждого класса иммуноглобулинов.

    Рассмотрим интерпретацию возможной расшифровки ИФА анализа крови.

    • Отрицательный результат IgM, IgG, IgA – отсутствие иммунитета к инфекции.
    • Отрицательный результат IgM, IgA и положительный результат IgG – постинфекционный или поствакцинальный иммунитет.
    • Отрицательный или положительный результат IgG, IgA и положительный результат IgM – острая инфекция.
    • Положительный результат IgM, IgG, IgA – обострение хронического инфекционного заболевания.
    • Отрицательный результат IgM и отрицательный или положительный результат IgG, IgA – хроническая инфекция.
    • Отрицательный результат IgM и не определяются IgG, IgA – выздоровление.

    Преимущества метода

    Анализ крови методом ИФА имеет много достоинств. Можно выделить основные из них:

    • относительно высокая точность (чувствительность);
    • возможность проведения ранней диагностики;
    • возможность отслеживания динамики инфекционного процесса;
    • высокий уровень унификации, что позволяет проводить массовые обследования;
    • небольшой промежуток времени, необходимый для получения результата анализа;
    • удобство в работе;
    • автоматизация всех этапов анализа;
    • относительно небольшая стоимость.

    Недостатки

    Недостатком метода ИФА является то, что иногда он дает ложноотрицательные или ложноположительные результаты. Кроме технических ошибок при проведении исследования, причиной ложных результатов может быть ревматоидный фактор у пациента, наличие у него хронических болезней (при которых вырабатываются антитела), нарушения обмена веществ, прием некоторых лекарственных препаратов.

    ИФА анализ крови на паразитов

    С помощью данного метода исследования крови определяют наличие в организме следующих паразитарных процессов:

    • аскаридоз;
    • трихинеллез – анализ проводят несколько раз, максимальный уровень антител определяется на 4–12 неделе после заражения;
    • цистицеркоз;
    • тениоз;
    • фасциолез – антитела определяются в острой стадии заболевания;
    • описторхоз – проводят дифференциальную диагностику между хронической и острой формой болезни;
    • лямблиоз;
    • висцеральный и кожный лейшманиоз;
    • амебиаз;
    • токсоплазмоз.

    ИФА анализ крови на паразитов используется для выявления антигенов (паразитов и продуктов их жизнедеятельности) и антител (иммуноглобулинов). Иммуноглобулины вырабатываются в организме как антитела к антигенам. Специфичность данного метода при определении паразитов составляет 90%. С помощью этого анализа можно определить вид паразитов, их количество, и благодаря уровню антител проследить динамику развития процессов.

    Источник:
    http://ymadam.net/zdorove/sdaem-analizy/ifa-analiz-krovi.php

    ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

    Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

    Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

    Что такое ИФА

    ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

    Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

    ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

    Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

    Виды иммуноглобулинов

    Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

    Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

    Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

    необходимы для иммунного ответа

    способны связать 5 молекул антигена,

    нужны для формирования раннего иммунитета

    Образование местного иммунитета

    Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

    Показания к сдаче анализа на иммуноглобулины

    ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

    Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

    • вирусный гепатит;
    • ВИЧ-инфекция;
    • цитомегаловирус,
    • вирус Эпштейна-Барр,
    • вирус герпеса,
    • корь
    • краснуха,
    • туберкулез,
    • сальмонеллёз,
    • дизентерия,
    • клещевой энцефалит,
    • бактерии хеликобактер,
    • боррелиоз,
    • столбняк,
    • сифилис,
    • дифтерия,
    • лептоспироз,
    • хламидиоза,
    • уреаплазмоз,
    • микоплазмоз,
    • коклюш.

    Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

    • плоскими червями
    • аскаридами
    • гистолическими амебами,
    • печеночными тремадами,
    • лямблиями,
    • токсоплазмами,
    • трихинеллами,
    • двуусткой,
    • цестодозами.

    ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

    Подготовка к сдаче анализа

    При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

    • за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
    • не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
    • стараться не допускать стрессов,

    Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

  • прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.
  • Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

    Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

    Порядок взятия пробы

    В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

    Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

    Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

    Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

    Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

    Как делают анализ

    После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

    Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

    • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
    • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
    • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

    В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

    Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

    При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

    Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

    После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

    При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

    Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

    Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

    Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

    Когда будет готов анализ

    Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

    Результаты теста и их расшифровка

    На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

    Возможны различные интерпретации результатов:

    1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
    2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
    3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
    4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
    5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
    6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

    Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

    • вирусный гепатит;
    • цитомегаловирус;
    • герпес;
    • ветряная оспа;
    • хламидиозом;
    • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

    Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

    Источник:
    http://healthperfect.ru/ifa-analiz.html